به­ طور کلی در روش­های پیرومتالورژی مقادیر زیادی گازهای گوگردی آلاینده محیط زیست تولید می­ شود و لذا از دیدگاه زیست محیطی چندان مطلوب نمی ­باشد. همچنین، این روش نیازمند سرمایه گذاری و تجهیزات بسیار پیشرفته­ای می­باشد. محصول نهایی فلز ناخالص حفره داری می­باشد که بایستی در کوره­های الکتریکی و یا گرمایی پالایش گردد.
روش هیدرومتالورژی:
این روش در مورد معادن کم­عیار^[۹] به­کار می­رود، که در مرحله اول محلول فروشویه را که ممکن است، اسید، باز، نمک و یا میکروارگانیسم­ها باشد فلز موجود در سنگ معدن را به صورت محلول در آورده و از سنگ معدن جدا می­ کند که در ادامه کار با بهره گرفتن از روش­های مختلفی نظیر رسوب دهی^[۱۰] و یا الکترولیز^[۱۱] فلز حل شده را جدا می­ کنند (Escobar, 2010)، استخراج فلزات به روش هیدرومتالورژی شامل دو مرحله است:

1. 1. حل کردن کانی­های معدنی به کمک حلال مناسب به نحوی که در این فرایند قسمت بیشتر فلز موردنظر به صورت محلول و یا رسوب درآمده و از باطله خود جدا می­ شود.

1. 1. جداسازی مجدد فلز حل یا ته­نشین شده با بهره گرفتن از روش­هایی مانند استفاده از حلال­های آلی، رسوب دهی جانشینی و الکترولیز.

مشکلات ناشی از روش­های رایج استخراج فلزات
در روش­های رایج استخراج فلزات، از مواد شیمیایی زیادی استفاده می­گردد، مثلا درآبشویه میکروبی^[۱۲] اسیدی برای استخراج فلز از اثر اسید بر روی سنگ معدن استفاده می­گردد، همچنین گازهای تولید شده در این روش­ها از جمله گاز(SO) باعث تولید باران­های اسیدی می­گردد (Mishra, 2005). مشکلات زیادی را می­توان در حوزه عمومی صنایع معدنی بر شمرد، بعضی از مهمترین این مسائل عبارتند از:

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

1. 1. کاهش منابع غنی سنگ معدن در سطح زمین و افزایش مصرف که باعث روی آوردن معدن­کاران به منابع فقیر در سطح زمین شده است.

1. 1. وجود منابع نسبتا فقیر در اعماق زمین که استخراج معدنی این سنگ­ها با روش­های کلاسیک مقرون به صرفه نیست.

1. 1. وجود دور ریزهای منابع غنی قبلی که حاوی مقادیر کمی از فلزات بوده و بازیابی این مقادیر به طرق کلاسیک غیرمقدور بوده و یا از نظر اقتصادی توجیه پذیر نیست.

1. 1. مصرف انرژی زیاد، به خصوص در متالورژی حرارتی

1. 1. نیاز به سرمایه ­گذاری زیاد که این صنایع با کمبود آن روبرو می­باشند.

1. 1. آلوده کردن محیط زیست که صنایع متالورژی سهم قابل توجهی در آن دارند و استانداردهای محیط زیست که جلوگیری از آلودگی را بسیار پرهزینه کرده است

1. 1. وجود فلزات سنگین در پساب کارخانه­ها که رهاسازی پساب در طبیعت بدون تصفیه و حذف فلزات آن طبق قوانین موجود ممنوع است و تصفیه این پساب­ها نیز به روش های کلاسیک بسیار گران بوده و یا مقدور نیست.

باطله­ها عموما با کانسنگ همراه می­باشند، و به باطله­های همراه با کانسنگ گانگ^[۱۳] می­گویند، جنس باطله­ها به طریقه تشکیل آنها بستگی دارد. مثلا باطله­های مگنتیت و هماتیت به طریقه جداسازی و پرعیارسازی آنها بستگی دارد.
جایگاه استفاده از روش­های زیستی در استخراج فلزات
صنایع معدنی امروزه با مشکلات زیادی روبرو است، از جمله: کاهش منابع غنی سنگ معدنی در سطح زمین و افزایش مصرف محصولات این صنایع، وجود منابع نسبتا فقیر در اعماق زمین، که استخراج معدنی این سنگ­ها با تکنولوژی فعلی مقرون به صرفه نیست، مصرف انرژی زیاد بخصوص در متالورژی حرارتی و آلوده کردن محیط زیست و همچنین گرانی­ها از جمله مشکلات پیش روی صنعت استخراج فلزات می­باشند.
استفاده از میکروارگانیسم­ها در استخراج فلزات دارای مزایایی است(سلامیان،۱۳۹۱) از جمله اینکه:

• • استخراج فلزات با عیار پایین، بدلیل کم بودن هزینه­هایی استفاده از میکروارگانیسم­ها، این روش توجیه اقتصادی پیدا می­ کند.

• • توان بازیابی فلزات از باطله­ها و ضایعات صنعتی

• • این روش احتیاج به مصرف انرژی سوختی و انرژی انسانی کمتری دارد

• • استفاده از میکروارگانیسم­ها که کلید اصلی این روش بوده و اجزای اصلی محیط می­باشند، بنابراین پس­ماندهای حاصل از آبشویه میکروبی فعالیت شیمیایی کمی بر روی محیط می­گذارند.

زیست شیمی آهن در زمین
آهن جزء عناصر فراوان زمین، و دومین فلز فراوان بعد از آلومینیوم در لیتوسفر^[۱۴] با تراکم ۵% می­باشد (Amoric, 2011). آهن در اشکال معدنی متفاوتی از جمله اکسیدها، کربناتها، سیلیکاتها و سولفیدها می­باشد.لاتریتها^[۱۵]رسوبات سطحی اکسیدهای آهن، بعنوان یک کشف مهم و با اهمیت در حوضه معدنی و با ارزش اقتصادی(مانند نیکل و کبالت) می­باشد(۱۶). آهن یک ماده ضروری برای همه اشکال شناخته شده زیستی است. در بعضی موارد موجود زنده احتیاجی به آهن ندارد در بعضی موارد استثنا مانند باکتریهای مغناطیس گرد^[۱۶]، مقادیر آهن سلولی بیشتر از ۱۱٫۵ برابر باکتریهای معمول می­باشد (Amoric, 2011).
در طبیعت آهن معمولاً به دوحالت اکسیداسیون وجود دارد، آهن دو ظرفیتی یا فروس(Fe⁺²)وآهن سه ظرفیتی یا فریک(Fe⁺³) که شکل غالب آن عمدتا به پارامترهای محیطی مانند pH، غلظت اکسیژن و پتانسیل اکسید و احیاء بستگی دارد. آهن به شکل پایدار خود در محیط­های بدون اکسیژن وجود دارد اما در حضور اکسیژن اکسایش شیمیایی می­یابد. که میزان اکسایش آن به درجه حرارت، غلظت پروتون و اکسیژن محلول بستگی دارد (Stum, 1996)
در بیشتر محیط ها سرعت اکسیداسیون شیمیایی خودبخودی آهن فروس(دو ظرفیتی) در pH های زیر ۴ خیلی پایین است. گرچه آهن فریک (سه ظرفیتی) در آبها بصورت ترمودینامیکی پایدار است، اما شدیدا تمایل به هیدرولیز شدن دارد، به این معنی که در قسمتهای مختلف آب در غلظت­های پایین وجود دارد، هرچند در حضور عوامل کمپلکس شونده، غلظت آهن فریک به صورت محلول بیشتر است. با این حال حلالیت آهن فریک در حالتی که به صورت کمپلکس نمی ­باشد به pH بستگی دارد(آبهای فوق العاده اسیدی،pH حدود ۲٫۵ و یا کمتر) در این محیط­ها میزان یون فریک بالا بوده، که خود یک عامل اکسایش قوی می­باشد.
اهمیت بعدی شیمی آهن که به طور عمده بعنوان یک منبع تغذیه برای برخی از انواع پروکاریوت­های شیمیولیتوتروف است، اختلاف پتانسیل اکسید و احیاء^[۱۷] جفت آهن فروس به فریک (Fe⁺²/Fe⁺³) می­باشد،که توسط pH محلول، بر روی هر دو شکل آهن تأثیرگذار است(روی آهن فریک به میزان کمتری نسبت به آهن فروس اثر می­ گذارد). همچنین حضور مواد کمپلکس شونده در محیط نیز بر روی شیمی آهن موثر است. بیشترین حالت اکسیداسیون زیستی جفت آهن فروس به فریک در مایعاتی با pH اسیدی می­باشد، که هر دو شکل به صورت محلول وجود دارند، در صورتیکه در pH خنثی پتانسیل اکسید و احیاءکمتر از شرایط اسیدی بوده و فروس و فریک به صورت نامحلول(کربنات فروس و هیدروکسید فریک) می­باشد (Ingledew, 1992).
عواملی همچون اکسیداسیون آهن فروس، انحلال پذیری آهن و پتانسیل اکسید و احیاء جفت آهن فروس به فریک تاثیر زیادی بر روی بیواکسیداسیون میکروبی آهن دارد. میکروارگانیسم­هایی که در محیط­های بشدت اسیدی زندگی می­ کنند با محدودیت­های ترمودینامیکی برای کسب انرژی از اکسیداسیون آهن مواجه هستند، به این معنا که فقط اکسیژن مولکولی می ­تواند بعنوان گیرنده الکترون برای اکسیداسیون آهن عمل کند. گرچه پرکلرات می ­تواند بعنوان یک پذیرنده میانی الکترون برای اکسیداسیون آهن در محیط های خیلی اسیدی عمل کند، اما عموما این ترکیب در محیط کمیاب است و عمدتا سمیت آنیونی را برای اسیددوست­ها به همراه دارد (Ingledew, 1992). پتانسیل اکسید و احیاء برای جفت اکسیژن/آب وابسته به pH می­باشد.
در ۲pH پتانسیل اکسید و احیاء جفت، اکسیژن/آب حدود ۳۰۰ میلی ولت مثبت تر از مقدار ان در ۷pH است که اکسیژن را بعنوان یک پذیرنده الکترون مناسبتر در اسیدوفیلها، نسبت به انواع نوتروفیلها می­سازد. اکسیداسیون آهن فروس از نظر میزان انرژی یک واکنش با بازدهی پایین می­باشد(حدود ۳۰ کیلوژول برمول در اسیدیته ۲) و باکتری اسیدوفیل Acidithiobacillus ferrooxidans برای تثبیت یک مول CO₂ بطور میانگین ۷۱ مول آهن فروس را اکسید می­ کند. اکسیداسیون آهن در pH خنثی، می ­تواند بوسیله باکتریهای فتوتروف ارغوانی نیز انجام گیرد، به این صورت که در تضاد با محیط­های اسیدی، اکسیداسیون متفاوتی از آهن، در محیط­های بدون اکسیژن بخوبی در pH خنثی رخ می­دهد. جفت شدن اکسایش آهن با احیاء اکسیژن در۷pH از نظر انرژیتیک مطلوب است.

شکل ۲-۱) شیب الکترونی جفت اکسیداسیون احیاء فروس به فریک و پذیرنده­های الکترونی مناسب (Hedrich, 2011)
میکروارگانیسم­ها می­توانند از دامنه وسیعی از الکترون دهنده­ها و الکترون گیرنده ها به منظور تولید انرژی برای متابولیسم استفاده کنند. قوی­ترین دهندگان الکترون در بالای برج و قوی­تری گیرندگان الکترون در پایین برج الکترونی نشان داده شده ­اند، جانوران قادرند تنها از کربن به­عنوان دهنده الکترون و از اکسیژن به­عنوان گیرنده الکترون استفاده کنند. در صورتیکه میکروارگانیسم­ها توانایی جفت کردن دهنده و گیرنده الکترون را دارا می­باشند. در برج الکترونی دهندگان الکترون بالاتر از گیرنگان الکترون قرار دارند (HedrichSabrina, 2011).
اهمیت میکروارگانیسم­ها در استخراج فلزات
بیش از۷۰­مطالعه میکروبیولوژی­از معادن سولفیدی منتشر شده است. فرآیندهای میکروبیولوژی و بیوژئوشیمیایی مربوط به فروشویی مورد مطالعه قرار گرفته است. اکسیداسیون پیریت ^[۱۸]و یا پیروتیت ^[۱۹]بیشتر به فرآیندهای بیوژئوشیمیایی^[۲۰] در ضایعات معادن سولفیدی مربوط می­ شود، و تکنیک­های متفاوتی برای اندازه ­گیری سرعت واکنش بکار برده شده است (Diaby, 2007) (Schippers, 2010)از جمله: ستون آزمایشگاهی، سلولهای رطوبتی، اندازه ­گیری جریان هوای گرم و اندازه ­گیری اکسیژن مصرفی. میکروارگانیسم­های اسیددوست اکسیدکننده آهن و سولفور عمدتا اکسیداسیون فلزات سولفیدی را انجام می­ دهند. فرآیندهای بیوژئوشیمیایی بی­هوازی در معادن سولفیدی به احیاء آهن فریک و سولفات مربوط می­شوند، اما در مورد سرعت واکنش این فرایند مطلب زیادی وجود ندارد. میکروارگانیسم­های احیاء کننده آهن فریک، ترکیب آهن فریک اکسیده(هیدراته) را حل کرده، که احتمالا از این طریق مانع از جذب آن شده و یا اینکه آن را رسوب می­ دهند. میکروارگانیسم­های احیاء کننده سولفات بعضی فلزات را رسوب می­ دهند و یا اینکه آنها را از چرخه خارج می­ کنند^[۲۱]. اخیرا تکنیکهای بیولوژی مولکولی برای بررسی تنوع میکروبی و سنجیدن و پردازش خصوصیات میکروارگانیسم­ها بکار برده شده است. تا کنون باکتری­ ها و آرکی­های اسیددوست اکسیدکننده آهن، بیشترین ارتباط را به اکسیداسیون فلزات سولفیدی دارند و نقش مهم و عمده­ای را در آن بازی می­ کنند (Schippers, 2010)
میکروبیولوژی معادن سولفیدی
از آنجا که میکروارگانیسم­ها فرآیندهای اکسید و احیاء ترکیبات فلزی را در معادن کاتالیز می­ کنند، آنالیز جمعیت­های میکروبی اطلاعات مهمی را برای دانستن اینکه این موجودات مسئول انجام چه فرآیندهایی هستند را در اختیار می­ گذارد.
تنوع میکروبیولوژی در معادن سولفیدی، شامل گونه­ های هوازی و بیهوازی است،که می­توانند اتوتروف^[۲۲]،یا هتروتروف^[۲۳] باشند (Bosecker, 1997).یک لیست جامعی از میکروارگانیسم­هایی با جنس­های مختلف از سه شاخه: باکتری­ ها، آرکی­ها و یوکاریاها که از معادن با روش های کشت و شناسایی مولکولی جدا شده ­اند، در جدول زیر آمده است
جدول( ۲-۱) میکروارگانیسم­های اکسیدکننده آهن وسولفور جدا شده در جهان(۲۰۱۰

جنس اکسیداسیون احیاء
کربن سولفور یون فرو سایر فلزات پیریت سولفات یون فریک

ابتدا از داخل (شعاع درونی) و سپس از میان وارد ناحیه­ی پلاستیک می­ شود.

شروع ناحیه­ی پلاستیک از ناحیه­ی بیرونی (شعاع خارجی) می­باشد.

ابتدا از ناحیه­ی بیرونی و سپس از داخل وارد ناحیه­ی پلاستیک می­ شود.

از ناحیه­ی بیرونی و داخلی باهم شروع به تسلیم شدن می­ کند.

همان­طور که در جدول ۵-۱-۱ مشاهده می­ شود، پارامترهای ماده تأثیرات فراوانی در رفتار مواد تابعمند برای ساختار کره دارند و گرادیان دما اثر عکس در ایجاد تنش نسبت به بارگذاری فشار داخلی دارد. در شکل ۵-۱-۱ می­بینیم که فشار داخلی باعث ایجاد تنش­های کششی می­ شود و تنش­های فشاری به وسیله­ اضافه شدن بارگذاری حرارتی ایجاد می­گردند و این باعث می­ شود که در اثر بارگذاری حرارتی دیر­تر به نقطه­ی تسلیم برسد.

( اینجا فقط تکه ای از متن پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

شکل ۵-۱-۱ : اختلاف تنش مماسی و شعاعی برای مشخصات ردیف دوم در جدول ۵-۱-۱ هنگام رسیدن به نقطه­ی تسلیم
در شکل ۵-۱-۱، با توجه به ردیف­ دوم جدول ۵-۱-۱، فشار ۵۵ مگاپاسکال، فشاری است که در آن، مخزن کروی بدون بارگذاری اختلاف دما به تسلیم برسد. در شکل­های ۵-۱-۲ و ۵-۱-۳ به­ترتیب، مقایسه­ تنش­های شعاعی و مماسی برای مشخصات ردیف دوم آورده شده است.
شکل ۵-۱-۲ : تنش­های شعاعی برای مشخصات ردیف دوم در جدول ۵-۱-۱ هنگام رسیدن به نقطه­ی تسلیم

شکل ۵-۱-۳ : تنش­های مماسی برای مشخصات ردیف دوم در جدول ۵-۱-۱ هنگام رسیدن به نقطه­ی تسلیم
با توجه به نمودار ۵-۱-۱ متوجه شدیم که علامت تنش­ها برای بارگذاری­های فشار داخلی و اختلاف دما متفاوت است. اگر نمودار اختلاف دما بر حسب فشار داخلی برای ردیف­های جدول ۵-۱-۱ رسم کنیم به شکل ۵-۱-۴ می­رسیم.
شکل ۵-۱-۴ : نمودار بارگذاری­های اختلاف دما برحسب فشار داخلی برای مشخصات ردیف­های جدول ۵-۱-۱
ردیف­های دوم و سوم در جدول ۵-۱-۱، نقش پراهمیت پارامتر مربوط به مدول الاستیسیته را نشان می­دهد. همچنین ردیف­های چهارم و پنجم، نقش مهم پارامتر مربوط به ضریب انبساط گرمایی که با تغییر آن، آغاز ناحیه پلاستیک نیز تغییر می­ کند.
اگر ساختار مخزن کروی را تغییر بدهیم (سطح درونی از فولاد در نظر گرفته شود)، برای پنج نمونه، بررسی پارامترها به صورت جدول ۵-۱-۳ به دست می ­آید. توضیحات کامل­تر برای شکل­های جدول ۵-۱-۳ را می­توان در جدول ۵-۱-۴ مشاهده نمود. با رسم سه نمونه از بارگذاری­های مربوط به ردیف­های جدول ۵-۱-۳ به نمودار شکل ۵-۱-۵ می­رسیم.
جدول ۵-۱-۳ : نتایج رفتار مخزن (سطح داخلی از جنس فولاد) با شعاع درونی ۰۶/۰ و شعاع خارجی ۱/۰ تحت بارگذاری گرادیان دما و فشار داخلی

N

γ

ξ

μ

η

ΔT=0°C
( )

ΔT=
۰.۵
°C

P=0 MPa
( )

P=
۰.۵ MPa

P=
MPa

۱

-۳

۱.۱

-۳

برای سنجش فعالیت آنزیم ۶۰ میکرولیتر از گلیسرول حاوی نمونه از یخچال ۸۰- برمیداریم و به ۵ میلی لیتر از محیط LB انتقال می دهیم. این محیط را به مدت یک روز در شیکر انکوباتور می گذاریم. سپس ۱۰۰۰ میکرولیتر از هر محیط LB برمی­داریم در ۱۵ میلی لیتر از محیط کشت اولیه حاوی کوتین در هر فالکون می­ریزیم ودر شیکر انکوباتور قرار می­دهیم و بعد از رشد نمونه ها، در ۴۰۵ نانومتر اسپکت می­گیریم.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

برای assay باید دو بافر تهیه می­کنیم:
بافر یک: ۰۱۷/۰ گرم KH₂PO₄ (merk5/99%)در ۵ میلی لیتر آب حل می­کنیم ( بافر فسفات) بعد pH را در ناحیه­ی ۵/۷ تنظیم می­کنیم. سپس ۵/۲میکرولیتر تریتونX_100 اضافه می­کنیم.
بافر دو: ۰۱۷/۰گرمKH₂PO₄ (merk5/99%) در ۵ میلی لیتر آب حل می­کنیم ( بافر فسفات) بعد pH را در ناحیه­ی ۵/۷ تنظیم می­کنیم. سپس ۲۵ میکرولیتر تریتونX_100 و ۸ میکرولیتر PNPBاضافه می­کنیم.
فالکون­های حاوی نمونه را ۹۰۰۰ دور به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفیوژ می­کنیم.
نمونه: در یک ویال ۷۰۰ میکرولیتر بافر یک، ۱۰۰ میکرولیتر بافر دو و ۲۰۰ میکرولیتر از نمونه موجود در محیط مایع سانتریفیوژ شده مرحله قبل می­ریزیم.
به منظور تهیه Blank : 200 میکرولیتر از هر نمونه موجود در فالکون را در یک ویال می­ریزیم به مدت ۵ دقیقه در آب در حال جوش می­گذاریم سپس به انها ۷۰۰ میکرولیتر بافر یک و ۱۰۰ میکرولیتر بافر دو می­ریزیم.
بعد از تهیه نمونه و Blank به منظور تست دوم شناسایی باکتری­ های دارای فعالیت کوتینازی، نیم ساعت صبر کرده و میزان جذب نمونه­ها را می­خوانیم. نمونه­های دارای جذب، نشان دهنده وجود انزیم کوتیناز در آنها می­باشد [۸۴].
Assay ویژه آنزیمی
از نمونه­های غربالگری شده­ای که قبلا ثابت شده است فعالیت آنزیمی دارد استفاده می­کنیم.
بدین منظور برای سنجش فعالیت آنزیم ۸۰ میکرولیتر از گلیسرول حاوی این نمونه­ها را از یخچال ۸۰- برمیداریم و به ۵ میلی لیتر از محیط LB انتقال می­دهیم به مدت یک روز در شیکر انکوباتور گذاشته و سپس ۵ دقیقه با دور ۴۰۰۰ دور سانتریفیوژ می­کنیم در مرحله ی بعد سوپ رویی را دور می­ریزیم و مابقی را به ۵ میلی لیتر محیط کشتی که کوتین تنها منبع کربن آن برای استفاده میکروارگانیسم­ها است انتقال می­دهیم و به مدت ۴ تا ۵ روز در شیکر انکوباتور با دمای ۳۰ درجه و ۱۵۰rpm انتقال می­دهیم. مانند مرحله قبل، در یک ویال نمونه و در یک ویال Blank را تهیه می­کنیم و از لحظه صفر تهیه نمونه به مدت نیم ساعت، هر یک دقیقه یکبار میزان فعالیت آنزیم را بررسی می­کنیم. در نهایت داده ­ها را وارد excel کرده و از طریق معادلات انزیمی میزان فعالیت هر آنزیم را محاسبه می­کنیم.
استخراج DNA
به منظور استخراج DNA جهت انالیز ۱۶sDNA و نشانگر RAPD از روش­های مختلفی از قبیل جوشاندن،CTAB و کیت استفاده شد که مراحل هر کدام در زیر امده است.
استخراج DNA به روش جوشاندن
۳۰ میکرو از گلیسرول مایع را به ۵ میلی لیتر از محیط LB تلقیح می­کنیم به مدت ۲۴ ساعت در شیکر انکوباتور ۳۰ درجه سانتیگراد با ۱۵۰rpm قرار می­دهیم و سپس ۱ میلی لیتر از هر کدام را در ویال ریخته و به مدت ۵ دقیقه rpm 1000سانتریفیوژ می­کنیم فاز رویی را دور ریخته و ۲۰۰ ماکرو آب دوبار تقطیر به آنها اضافه می­کنیم و ورتکس می­کنیم تا کامل حل شود و سپس ۱۵ دقیقه در اب ۹۰ درجه گذاشته و سپس ۵ دقیقه در روی یخ می­گذاریم و سپس ۱۵ دقیقه آب ۹۰ درجه و ۵ دقیقه یخچال ۸۰- و در نهایت برداشته و به مدت ۵ دقیقه با ده هزار دور سانتریفیوژ می­کنیم سوپرناتانت رویی را که همان DNA است را بر می­داریم و در یخچال ۲۰- درجه قرار می­دهیم.
استخراج DNA به رو ش CTAB
قبل از انجام مراحل استخراج DNA، محلول­ها و بافرهای مورد نیاز به شرح زیر تهیه شدند.

1. 1. نیتروژن مایع

1. 1. بافر استخراج CTAB: (100میلی­لیتر Tris-HCl 1مولار با PH=8، ۲۸۰میلی­لیتر NaCl 5مولار، ۴۰ میلی­لیتر۵/۰ EDTA مولار، ۲۰ گرم CTAB (cetyltrimethyl ammonium bromide) به حجم نهایی ۱ لیتر رسانده شود.

1. 1. کلروفرم – ایزو آمیل الکل به نسبت ۲۴ به ۱

1. 1. ایزو پروپانول ۱۰۰%

1. 1. اتانول ۱۰۰%

1. 1. استات آمونیوم ۵/۷ مولار

1. 1. محلول TE: (میلی­لیتر Tris-HCl 1مولار با PH=8،۲ میلی­لیتر EDTA 0.5 مولار و با H₂O دوبار تقطیر شده به حجم ۱ لیتر برسد).

مشخصات کامل مواد شیمیایی مورد نیاز در عملیات استخراج DNA در ‏جدول ۳-۲ شرح داده شده است
.
جدول ‏۳‑۲ مشخصات کامل مواد شیمیایی مورد نیاز در عملیات استخراج DNA

نام اختصاری

نام کامل

فرمول شیمیایی

جرم مولکولی

شرکت تولیدکننده

EDTA

Ethylenediamine tetraacetic acid disodium salt 2-hydrat

C10H14N2Na2O82H2O

M=372.24
g/mol

Merck

Tris

در این پایان نامه باید به تمامی سوالات زیر پاسخ داد و بیان نمود که ایا جداساز اصطکاکی پاندولی مفید تر می باشد یا جداساز لاستیکی –سربی بنابراین باید تمامی زوایای جداساز ها را مورد بررسی قرار داد.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

۱-۵- ضرورت انجام تحقیق
با توجه به زلزله خیز بودن ایران و خطرات جانی و مالی باید به دنبال روش های مبنی بر کاهش خطرات فوق بود. از انجا که استفاده از جداساز روشی جهت کاهش خطرات فوق به حساب می اید به همین دلیل باید بر روی ان ها تحقیقات گسترده ای انجام داد تا بتوان فهمید در چه شراطی دارای تاثیر مثبتی می باشند
۱-۶- اهداف تحقیق

1. 1. شناسایی مفید بودن جداساز لرزه ای در سازه ها ی بلند یا کوتاه.

1. 1. شناسایی مفید بودن جداساز لرزه ای( اصطکاکی پاندولی و جداساز لاستیکی سربی) در روند کاهش برش پایه سازه و مقایسه با سازه بدون جداساز لرزه ای .

1. 1. بررسی انرژی جذب شده توسط اعضای سازه جداسازی شده و بدون جداسازی شده.

1. 1. بررسی سازه مهاربندی شده با بادبند همگرا در سیستم جداسازی شده و جداسازی نشده .

۱-۷- پیشینه تحقیق
۱-محمت کومور و همکاران (۲۰۱۰ م) تحقیقی تحت عنوان تحلیل تاریخچه زمانی غیر خطی بر روی سازه های بتنی با جداساز سربی و بدون جداساز بر روی سازه های ۴ طبقه و ۸ طبقه انجام دادند که به بررسی شتاب طبقات،برش پایه و جابه جایی طبقات پرداخته اند و نتیجه گرفتند که سازه های جداسازی شده شتاب کمتری داشته و همچنین برش پایه طبقات در ان کمتر بوده و سیستم سازه ای جداسازی شده را پیشنهاد کرده اند.
۲-لو و چانگ چین(۲۰۰۳م) تحقیقی تحت عنوان سازه های جداسازی شده تحت زلزله حوزه نزدیک انجام داده اند و به بررسی ۳ اثر زلزله حوزه نزدیک(۱-ماکزیمم شتاب وارده از سطح زمین ۲-ماکزیمم شتاب قائم وارد از سطح زمین۳- حرکت پالس گونه زلزله حوزه نزدیک ) بر سازه های جداسازی پرداخته اند و همچنین بیان نموده اند علت اصلی بزرگ شدن دریفت در سازه های جداسازی شده حرکت پالس گونه شتاب می باشد .مزیت اصلی تحققیق انها این است که کاملا واقعی و در ازمایشگاه صورت گرفته است .و همچنین انها به این نتیجه رسیدند دریفت و شتاب طبقات در پریود زمانی که حرکت پالس گونه است بیشنه می شود و سپس کاهش میابد.
۳-شریعتمداروکلانتری(۱۳۸۷ش) تحقیقی تحت عنوان اثر جداگر های لرزه ای بر جابه جایی طبقات و تشکیل مفصل پلاستیک انجام داده اند که در این تحقیق جداگر های لاستیکی –سربی عموما جابه جایی بیشینه طبقات را در سازه های کوتاه نسبت به جابه جایی بیشینه بام این سازه ها در حالت گیردار افزایش می دهند. اما در مورد جداگر های اصطکاکی پاندولی جدایی حداکثر انها از جابه جایی حداکثر سازه گیردار در بام بیشتر نمی باشد.همچنین انها در این تحقیق به بررسی مفاصل پلاستیک پرداخته اند و سازه های کوتاه و بلند با جداساز و بدون جداساز را با یکدیگر مقایسه نموده اند
۴-جواد واثقی وشیما اسماعیل زاده(۱۳۹۰ ش) تحقیقی تحت عنوان عملکرد سازه های فولادی جداسازی شده با جداگر های پایه پاندولی اصطکاکی تحت تحلیل استاتیکی غیر خطی انجام داده اند که به بررسی تغییر مکان نسبی و مفاصل پلاستیک تشکیل شده پرداخته اند و نتیجه ای منباب کاهش تغییر مکان نسبی طبقات و مفاصل پلاستیک در سازه جداسازی شده حاصل شده است مشکل این تحقیق در ان است که این نتیجه در همه سازه ها صادق نیست .همچنین با بررسی رفتار سیستم های جداسازی شده در این تحقیق می توان گفت قابلیت جذب انرژی در سازه های جداسازی شده نسبت به سازه های با تکیه گاه ثابت بیشتر بوده و با افزایش دوره تناوب در سازه های جداسازی شده قابلیت جذب انرژی و شکل پذیری در سازه افزایش می یابد.
۵-محسن گرامی ومصطفی فخاری(۱۳۹۰ ش) تحقیقی تحت عنوان جداساز های لاستیکی-سربی و دمپر ویسکوز بر رفتار لرزه ای سازه های نزدیک گسل انجام داده اند و بیان کرده اند سازه های ایزوله شده تحت زلزله حوزه نزدیک ضعیف بوده و می توان با میراگرها رفتار سازه را اصلاح نمود و می توان بیان نمود کاربرد میراگر ها در سیستم های جداساز در ابتدا موجب کاهش جابجای نسبی طبقات در زلزله های حوزه نزدیک می گردد و در نهایت تحت زلزله های دور از گسل جابجای نسبی طبقات افزایش میابد .
۶-حسینی وبسطامی(۱۳۹۰ش)تحقیقی تحت عنوان نقش جداساز های لاستیکی سربی (LRB) بر سازه های فولادی تحت زلزله حوزه نزدیک انجام داده اند و بیان کرده اند جداساز های لاستیکی سربی در کاهش شتاب طبقات و برش پایه سازه تحت زلزله حوزه نزدیک نقش بسزایی خواهد داشت همچنین نکته قابل توجه این است که جداساز لاستیکی سربی زمان تناوب سازه را افزایش می دهد از این رو امکان رخ داد پدیده تشدید کاهش پیدا می کند و همچنین بیان کرده اند در سازه های با جداساز تشکیل مفصل پلاستیک را کاهش می دهد .
۱-۸- فرضیات تحقیق

1. 1. جداساز لرزه ای باعق کاهش شتاب،برش پایه، جابه جایی نسبی طبقات می گردد

1. 1. جداساز لرزه ای گاهی اقتصادی و مقرون به صرفه برای استفاده در سازه نمی باشد.

1. 1. سیستم جداساز لرزه ای پریود ارتعاشی را می تواند افزایش دهد که باعث کاهش ضریب بازتاب می گردد.

1. 1. استفاده از سیستم ترکیبی جداساز پایه و مهاربند همگرا باعث شکل پذیری بیشتر سازه می گردد.

1. 1. پارامتر مهم در سیستم جداساز لرزه ای بازگرداندن سازه به محل اولیه پس از تغییر مکان می باشد.

1. 1. جداساز لرزه ای روشی مبتنی بر کاهش میزان تقاضای سازه می باشد و نه افزایش ظرفیت ان.

۱-۹-اهداف تحقیق

1. 1. شناسایی مفید بودن جداساز لرزه ای در سازه ها ی مهربندی شده بلند ، متوسط و کوتاه.

1. 1. شناسایی مفید بودن جداساز لرزه ای( اصطکاکی پاندولی و جداساز لاستیکی با میرایی بالا) در روند کاهش برش پایه سازه و مقایسه با سازه بدون جداساز لرزه ای .

1. 1. بررسی انرژی جذب شده توسط اعضا سازه جداسازی شده و بدون جداسازی شده.

1. 1. مقایسه دو جداساز اصطکاکی پاندولی و لاستیکی با میرایی بالا و پیشنهاد جداساز بهتر برای سازه های مهاربندی شده.

1. 1. بیان این که جداساز برای کدام سازه ها (بلند،کوتاه،متوسط) مقرون به صرفه خواهد بود

1. 1. مقایسه تحلیل استاتیکی،طیفی،تاریخچه زمانی غیر خطی بروی سازه جداسازی شده و نشده برای ضریب اطمینان بیشتر.

۱-۱۰- سؤالات تحقیق

1. 1. ایا جداساز های لرزه ای (لاستیکی- سربی و اصطکاکی پاندولی و…) برای تمام سازه های با مهار بند همگرا از نظر جابه جایی نسبی ،مفصل پلاستیک،شتاب طبقات و … مفید است؟

1. 1. ایا جدا ساز های لرزه ای برای سازه های بلند موثر خواهد بود یا برای سازه های کوتاه ؟

1. 1. کدامین جداساز (اصطکاکی پاندولی ،سربی لاستیکی) مناسب سازه خواهد بود؟

۱-۱۱- روش تحقیق و گردآوری داده ها
دستیابی به هدف های علم یا شناخت علمی، میسر نخواهد بود، مگر زمانی که با روش شناسی درست صورت پذیرد. به عبارت دیگر تحقیق از حیث روش است که اعتبار می یابد و نه از حیث موضوع تحقیق.
روش انجام این پژوهش ارزشیابی و از نوع پیمایشی است. ارزشیابی بدین جهت که میخواهیم بر پایه ضابطه یا معیارهای معینی نسبت به مختصات موضوع به نسبت آنچه باید باشد داوری و ارزشیابی کنیم و روابط موجود بررسی گردد، پیمایشی نیز بدین جهت که در ان موضوع مربوط به زمان حال است و در پی آنیم که با گردآوری داد ه ها واطلاعات درباره شرایط فعلی به شناخت بهتر و کاملتری از وضع موجود برسیم . سیستم مورد مطالعه که یک سیستم کنترل غیر فعال می باشد ، برای محافظت سازه در برابر زلزله های قوی و پر شدت پیشنهاد می گردد. هدف اصلی این تحقیق بررسی رفتار لرزه ای قابهای فولادی با مهاربند همگرا جداسازی شده ، و مقایسه آن با قابهای مهاربندی همگرا پایه گیردار می¬باشد. این هدف با روش های تحلیل سازه ای خطی و غیر خطی شامل تحلیل های استاتیکی ، طیفی ،دینامیکی خطی وتحلیل دینامیکی غیر خطی با بهره گرفتن از زلزله السنترو (ELCENTRO) که زلزله ای کاربردی می باشد استفاده می گردد شایان ذکر است مدت رکورد زلزله ۴۰ ثانیه اختیار می گردد به دلیل طیف وسیع شتاب زلزله که در این مدت زمان قرار دارد. ، و با کمک نرم افزارهای Seismo signal v5 و SAP2000 V15 تحقق می یابد. در این تحقیق سه(۳) قاب مهاربندی شده ۱۱ طبقه ،۷ طبقه و ۴ طبقه انتخاب می گردد و در زیر تمامی قابها یکبار جداساز اصطکاکی پاندولی قرار داده و یکبار جداساز لاستیکی با میرایی بالا قرار می دهییم و یکبار هم ۳ قاب مهاربندی شده را گیردار فرض میکنیم حال با انجام تحلیل های استاتیکی و دینامیکی به بررسی مقایسه بین قابها می پردازیم. ایده های اصلی که برای این تحقیق ارائه و مورد بحث قرار گرفته اند عمدتا حول محور های زیر می باشند:

1. 1. قرار دادن جداساز اصطکاکی پاندولی زیر هر سه قاب و انجام تحلیل استاتیکی، طیفی، دینامیکی خطی و دینامیکی غیر خطی

1. 1. قرار دادن جداساز لاستیکی با میرایی بالا زیر هر سه قاب و انجام تحلیل استاتیکی، طیفی، دینامیکی خطی و دینامیکی غیر خطی

1. 1. انجام تحلیل استاتیکی، طیفی، دینامیکی خطی و دینامیکی غیر خطی بر روی قاب مهاربندی شده همگرا با پایه ثابت

پس از مدل سازی تمامی قابها به بررسی شتاب طبقات ، برش پا یه، جابه جایی نسبی، جابه جایی کل ، جابه جایی بام در تمامی سازه ها پرداخته و نتایج با یکدیگر مقایسه شده بعد از ان نتایج قاب های با جداسازی اصطکاکی پاندولی و جداساز لاستیکی با میرایی بالا با یکدیگر مقایسه شده و جداساز بهتر معرفی می گردد بعد از این مرحله نتایج های تمامی قابها را برای تحلیل ها استخراج نموده و به مقایسه خواهیم پرداخت و سپسس قابها را از نظر ارتفاع بررسی میکنییم تا ببینینیم ایا جداساز ها برای تمامی سازه ها مهاربندی شده مفید می باشد یا خیر و همچنین بررسی خواهد شد که ایا جداساز برای سازه مقرون به صرفه خواهد بود یا خیر.
روش انجام این پژوهش ارزشیابی و از نوع پیمایشی است. ارزشیابی بدین جهت که می خواهیم بر پایه ضابطه یا معیارهای معینی نسبت به مختصات موضوع به نسبت آنچه باید باشد داوری و ارزشیابی کنیم و روابط موجود بررسی گردد، پیمایشی نیز بدین جهت که در ان موضوع مربوط به زمان حال است و در پی آنیم که با گردآوری داد ه ها واطلاعات درباره شرایط فعلی به شناخت بهتر و کاملتری از وضع موجود برسیم .و ما در این تحقیق قصد بررسی جداسازها بر روی سازه به منظور رسیدن به ایده و شناخت بهتر ان می باشیم . روش تجزیه و تحلیل تحقیق با نرم افزار های siesmo signal و sap2000 می باشد.
معرفی نرم افزار۲۰۰۰ sap :
نرم افزار sap2000 نرم افزار کاربردی مخصوص رشته عمران بوده که دارای قابلیت تحلیل و طراحی سازهای فولادی، بتنی ،پل ،مخازن و غیره را دارد.مختصر قابلیت این نرم افزار به شرح زیر می باشد.

– هزینه بالاتر

هنگامی که حق تقدم خرید سهام توانایی تأمینمالی شرکت را شدیدا محدود میکند. به این علت که سهامداران فعلی ممکن است منابع یا تمایل کمی درمقابل افزایش سرمایه داشته باشند. بنابراین شرکت ممکن است توجه جدی به تأمینمالی ازطریق بدهی و انتشار سهام برای عموم داشته باشد. در ارزیابی این راه ها درمقایسه با یکدیگر، پیآمد کنترل مهم است.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

بطورکلی پیآمد کنترل در چهار مورد بحرانی و مهم است: هنگامی که ‹‹صاحبان سهام اولیه^[۲۸]›› شرکت میزان مالکیت آنها به زیر۱۰۰ درصد، زیر۵۰درصد، زیر۴۰ درصد و زیر ۲۶ درصد کاهش یابد. معرفی مالکان خارجی برای اولین بار در شرکت، بیشتر یک مشکل روانی را اشاعه خواهد کرد و کمتر مشکل مدیریتی درپی خواهد داشت. چرا که سهامداران اولیه شرکت قادر هستند بیشتر از۵۰ درصد سهام شرکت را دردست گیرند. کنترل آنها بر روی مدیریت شرکت بحث و رقابتی را نخواهد داشت. یعنی باتوجه به اینکه آنها بیشتر از ۵۰ درصد سهام شرکت را دردست دارند، لذا هیچگونه مشکلی از لحاظ ازدست دادن کنترل و مدیریت شرکت برای آنها پیش نخواهد آمد. هنگامی که سهام جدید به افراد جدید (خارج ازشرکت) عرضه گردد، این امر ممکن است از نظر روانی برای سهامداران اولیه شرکت خوش آیند نباشد. اما درصورتی که شرکت بخواهد سرمایه دایمی خود را از طریق بازارسرمایه افزایش دهد، امری اجتناب ناپذیرخواهد بود.
هنگامی که افراد جدید درحقوق صاحبان سهام شرکت شریک میشوند، سهامداران اولیه شرکت ممکن است با حالتی مواجه شوند که میزان سهم (مشارکت) آنها درحقوق صاحبان سهام به کمتراز۵۰ درصد تنزیل یابد. برای بسیاری ازمالکان ممکن است مشکل باشد که از این مانع عبور نمایند. به عنوان مثال در کشور هند، بورس اوراق بهادار شرایط و احتیاجات برای افزایش سرمایه (فروش سهام) را فهرست مینماید. بنابراین شرکتی که فهرست مذکور را بررسی نماید، میبیند که بایست بطور معمول حداقل ۶۰% حقوق صاحبان سهام را به عموم مردم عرضه نماید.
سهامداران اولیه ضرورتاً باید خود را با کاهش مالکیت درحقوق صاحبان سهام شرکت به میزان ۴۰% تطبیق دهند. همچنین ممکن است کم کردن حقوق صاحبان سهام مورد نیاز باشد، برای تضمین اینکه شرکت منابع مورد نیاز برای تقویت رشد خود را تأمینمالی نماید. آخرین مانع اصلی در کشور هند به نظر میرسد کاهش سهم و میزان مشارکت سهامداران اولیه به ۲۶ % کل حقوق صاحبان سهام باشد. این مشکل بیشتر از این قانون ناشی میشود که برای تصویب یک راه حل یا طرح خاصی (درمجموع عمومی سهامداران) ۷۵% آراء مورد نیاز است. لذا این بدان معنی است که حفظ ۲۶% ازحقوق صاحبان سهام درشرکت برای بازداشتن هرگونه طرح یا راه حل خاصی کافی است. البته درعمل کنترل مؤثر میتواند از طریق داشتن سهم کوچکتری نیز اعمال گردد. به همین دلیل است که در بسیاری مؤسسات تجاری صاحبان سهام شرکت کم کردن میزان مالکیت شان را تحمل مینمایند. با این حال باداشتن میزان مالکیت کمتر، شرکت توسط آنها کنترل میگردد. اینطور بهنظر میآید که آنها خود را با کم کردن میزان مالکیت تطبیق میدهند. چرا که تنها راه فراهم نمودن و تسهیل توسعه و رشد شرکت پذیرفتن این امر است. (چاندر، ۱۹۹۰)
۲-۲-۲-۱-۹) قابلیت انعطاف:
یک شرکت انتظار دارد که ترکیب متعادل بدهی وحقوق صاحبان سهام خود را حفظ نماید افزایش مفرط میزان بدهی، توانایی شرکت برای اخذ وام را کاهش میدهد و به تبع آن قابلیت انعطاف شرکت را نیز میکاهد. نیاز به حفظ تعادل برای تضمین کردن قابلیت انعطاف در تأمین مالی، ساختارمالی را تحت تأثیرخود قرار میدهد. (هامپتون، ۱۹۹۱)
انعطاف پذیری اشاره به توانایی یک شرکت برای افزایش سرمایه خود از هر منبعی که بخواهد را دارد. این امر قابلیت مانور را برای مدیریت مالی شرکت فراهم مینماید. بطور کلی اگر نرخ بازده حقوق صاحبان سهام رضایت بخش باشد، شرکت میتواند سرمایه تأمین شده ازحقوق صاحبان سهام خود را افزایش بیشتری بدهد. زیرا نسبت بدهی به حقوق صاحبان سهام میتواند به صفرهم کاهش یابد. اما باید توجه داشت که نسبت بدهی به حقوق صاحبان سهام به طور معمول اجازه داده نمیشود که ازحد معینی تجاوز نماید. چرا که ممکن است میزان آن توسط کنترل کنندگان سرمایه شرکت مشخص شده باشد، یا توسط مؤسسات مالی ویا بازارسرمایه تعیین گردد. شرکت نمی تواند فرض نماید که بطور معمول سرمایه خود را ازطریق انتشار انواع اوراق بهادار میتواند افزایش دهد. چرا که انعطاف پذیری برای عملی نمودن اهداف ممکن است این مفهوم را تداعی نماید که شرکت نمیتواند بطور کامل ظرفیت بدهی خود را تمام نماید. این امر دلالت براین مفهوم دارد که شرکت قدرت وام گیری خود را حفظ نماید، تا اینکه آن را برای افزایش سرمایه از طریق بدهی برای احتیاجات پیشبینی نشده سرمایه که ممکن است به دلایل مختلف از قبیل: تغییرات درخطمشیهای دولت، شرایط رکودی در بازار، کاهش عرضه وجوه در بازار، کاهش تولید به دلیل کمبود انرژی یا اعتصابات وآشوبهای کارگری، تشدید رقابت، میبایست یک ظرفیت بدهی استفاده نشده معین را حفظ نماید تا اینکه پیشرفتهای آینده شرکت را از این طریق تضمین نماید. اما قابلیت انعطاف اشکالاتی را نیز بخصوص برای یک شرکت درحال رشد به دنبال خواهد داشت. اگر این قبیل شرکتها به منظورحفظ ظرفیت وام گیری، اقدام به افزایش سرمایه از طریق انتشار سهام نمایند. زمانی که بازار کاملا جنبه های رشد و توسعه شرکت را احساس نمیکند، قیمتی که سهام منتشره میتواند به فرش برسد، ممکن است بسیار کمتر از ارزش ذاتی سهام شرکت براساس چشمانداز وجنبههای رشد شرکت باشد. (چاندر، ۱۹۹۰)
۲-۲-۲-۱-۱۰) زمان بندی:
فرض کنید شرکتی تعیین کرده است که میبایست بدهی وحقوق صاحبان سهام را به نسبت مساوی در ساختار مالیاش داشته باشد. آیا این بدان معنی است که هرگاه شرکت بخواهد سرمایه خود را افزایش دهد، باید بدهی وحقوق صاحبان سهام به نسبت مساوی افزایش یابند؟ این امربه دو دلیل رخ نخواهد داد:
۱- غالباً تأمینمالی یک فرایند موج دارو متلاطم است، بطوری که برای یک شرکت مشکل است که نسبتهای معینی را در هر زمانی که افزایش سرمایه میدهد حفظ نماید.
۲- شرایطی که در بازار سرمایه وجود دارد معمولا ممکن است آن طور مناسب ومطلوب نباشدکه شرکت از هردو منبع تأمینمالی برای افزایش سرمایه خود استفاده نماید. ازاین رو زمانبندی یکی ازجنبههای مهم تأمینمالی محسوب میشود. غالباً شرکت باید تصمیم بگیرد که درحال حاضرسهام منتشر نماید و بعد از آن ازطریق بدهی تأمینمالی نماید، یا اینکه برعکس. اگرآینده بطور مطمئن شناخته شده باشد، دراین صورت تعیین و ترکیب و ترتیب بهینه تأمینمالی براساس تغییرات پیشبینی شده در بازار سرمایه آسان خواهد بود.
متأسفانه باتوجه به عدم اطمینان نسبت به بازارسرمایه، تغییرات آینده نمیتواند به طور دقیق پیشبینی شود. لذا تصمیمهای زمان بندی ضرورتاً باید برمبنای پیشرفتهای مورد انتظار در یک بازاری که به سختی قابل پیشبینی است صورت گیرد. اگر قیمت سهام شرکت فعلاً کاهش یافته اما انتظارمیرود که به دنبال عملکرد بهتر و یا پیشرفتهای سریعتر در بازار بعدا افزایش یابد، این امرممکن است مزیتی باشد برای ترتیب و تنظیم مجدد تأمینمالی که اکنون ازطریق بدهی تأمینمالی گردد وبعد ازآن از طریق انتشارسهام تأمینمالی صورت گیرد. و برعکس اگر قیمت سهام شرکت شناور است ، ممکن است اینطور مناسب باشد که درحال حاضر ازطریق انتشار سهام و بعد از آن ازطریق بدهی تأمینمالی صورت گیرد.
درحالی که زمان بندی بسیارمشکل (تقریباً غیرممکن) است، برای دستیابی به یک زمان بندی درست با درنظرگرفتن عدم اطمینان بازار، راهنماییهای زیرممکن است درجهت بهبود عملکرد یک شرکت درارتباط با مسأله زمانبندی درتأمینمالی مفید باشند:
هرگزحریص نباشید. اگر شرایط فعلی برای یک نوع معین تأمینمالی مناسب است از آن مزیت استفاده نمائید. منتظر این نباشید که ممکن است فردا بهتر باشد.
ازاینکه شیوه و تفکر دیگران بخواهد برشما مسلط گردد پرهیز نمائید. درحالی که مشورت با دیگران میتواند مفید باشد، اما اینکه ازاین طریق تفکر و عقاید دیگران بخواهد برشما چیره شود کاملاً پرهیزنمائید.
به ارتباطات بلندمدت بازار توجه کنید. به نظرمیآید که بازارهای مالی الگوهای رفتاری معینی را دنبال مینمایند که تمایل دارند آن را تکرار نمایند. اگرچه این الگوهای رفتاری نیز ممکن است کاملا عادی نباشند، اما آنها اصرار کافی روی آنان دارند. لذا این الگوهای رفتاری میتوانند به نحو مفید و سودآوری به عنوان نشانه های عمومی مورد استفاده قرار گیرند. (چاندر^[۲۹]، ۱۹۹۰)
البته باید یادآور شد که عوامل داخلی یا درونی مؤثر بر ساختار مالی (اهرم مالی) محدود به عوامل مذکور نیستند. عوامل دیگری نیزمی تواند وجود داشته باشند که به نوعی ساختار مالی را به عنوان عوامل درونی تحت تأثیرخود قرار دهند. دراینجا به عمدهترین و شایعترین این عوامل اشاره گردید.
۲-۲-۲-۲) عوامل خارجی مؤثر بر ساختارمالی:
عوامل خارجی یا برونی عبارتند از: ملاحظات خارج از شرکت که ترکیب بدهی وحقوق صاحبان سهام را تحت تأثیر قرار میدهند. ازقبیل موارد زیر:
۲-۲-۲-۲-۱) سطح عمومی فعالیتهای تجاری (شاخص صنعت)
سطح عمومی فعالیتهای تجاری یکی ازعوامل تعیین کننده ساختارمالی شرکتها است. اگرسطح عمومی فعالیتهای تجاری رونق یابد، اکثرشرکتها برای بسط وگسترش عملیات خود نیاز به پول دارند. لذا نیاز به منابع بلندمدت اضافی موجب میگردد که شرکتها به بازارهای پولی و مالی برای بدهی یا سهام روی آورند. اما کاهش و رکود در فعالیتهای تجاری موجب میگردد که شرکتها عملیات خود را محدود نمایند و نقدینگی خود را صرف بازپرداخت و بازخرید بدهی و سهام نمایند. (هامپتون^[۳۰]، ۱۹۹۱)
۲-۲-۲-۲-۲) سطح نرخ بهره
نرخ بهره اوراق قرضه یا بدهیها در بازار در پاسخ به عوامل عرضه و تقاضا نوسان مینماید. اگر نرخ بهره افزایش یابد، شرکتهایی که به تأمین مالی ازطریق بدهی متکی هستند، به تأمین مالی کوتاه مدت روی میآورند. تا وقتی که بدهی بلندمدت بتواند در نرخهای پائینتر عرضه شود یا اینکه به سهام روی میآورند. (هامپتون، ۱۹۹۱)
۲-۲-۲-۲-۳) سطح قیمت سهام
هنگامی که شرکتها سهام عادی جدید منتشر میکنند،‌ آنها سعی دارند تا آنجایی که ممکن است پول زیادتری از هرسهم دریافت نمایند. هنگامی که قیمت سهام کاهش یافته است شرکت سهام عادی عرضه نمیکند. اگر قیمت سهام بالا باشد، شرکت میتواند مقدار نسبتاً بیشتری پول ازطریق انتشارسهام نسبتاً کمتری ایجاد نماید.
۲-۲-۲-۲-۴) قابلیت دسترسی به وجوه در بازارها
بازارهای پول و سرمایه دائماً درحال تغییر و تحول هستند، رفتار آنها پدیده پیچیدهای است. در زمانی که پول فراوان است، شرکت میتواند راحتتر اقدام به انتشار اوراق قرضه یا سهام نماید که به فروش خواهد رفت. اما زمانی که پول کمیاب است انتشار و فروش اوراق قرضه و سهام با شکست مواجه میشود. لذا قابلیت دسترسی به وجوه، توانایی شرکت را برای انتشار و فروش اوراق قرضه، سهام و سایر اوراق بهادار تحت تأثیر قرار میدهد. (هامپتون، ۱۹۹۱)
۲-۲-۲-۲-۵) خط مشیهای مالیاتی برروی بهره و سود سهام
باتوجه به اینکه هزینه بهره به عنوان هزینه قابل قبول مالیاتی است، لذا شرکت قبل از آنکه مالیات را پرداخت نماید، ابتدا هزینه بهره را پرداخت نماید ، بدین جهت هزینه بهره برای شرکت صرفه جوییهای مالیاتی را دربر دارد. اما پرداخت سود سهام چه سهام عادی وچه سهام ممتاز بعداز پرداخت مالیات شرکت صورت میگیرد. بنابراین از نقطهنظر هزینه سرمایه، تأمینمالی ازطریق بدهی ارزانتر از تأمینمالی ازطریق سهام است. بدین لحاظ این امر موجب گشته است که درسالهای اخیرحجم انتشار سهام (تأمینمالی ازطریق سهام) در مقایسه با بدهی تاحد زیادی کاهش یابد. (هامپتون، ۱۹۹۱)
۲-۲-۲-۲-۶) دیدگاه و نظر وام دهندگان
مادامی که قابلیت دسترسی به وام واعتبار به تمایل وام دهندگان بستگی دارد. بنابراین دیدگاه و نظر آنها یکی از ملاحظات مهم در تصمیمات ساختارمالی است. میزان تمایل وام دهندگان دراعطای وام به شرکت، چه مؤسسات وام دهنده دولتی وچه خصوصی ضروری ومهم است. هنگامی که ما تأمین مالی ازطریق بدهی را جستجو میکنیم، نظر و موافقت سرمایه گذاران دولتی باید حاصل گردد. خصوصا هنگامی که جایگزینی مؤسسات خصوصی را به جای مؤسسات دولتی جستجو مینمائیم، این امر بسیار مهمتر و حساستر خواهدبود. (چاندر، ۱۹۹۰ )
۲-۲-۲-۲-۷) الگوهای رایج
ساختارمالی تحت تأثیر قوانینی است که بدین منظور مقرر گردیده است. که براساس آن یک شرکت در افزایش سرمایه خود میبایست نسبت بدهی به حقوق صاحبان سهام را رعایت نماید. حد تعیین شده به عنوان الگو یا هنجار تلقی شده که شرکتها برای حفظ اعتبارخود سعی مینمایند آن را رعایت نمایند. مثلاً رعایت نسبت بدهی متوسط صنعت به عنوان یک الگوتلقی شده که شرکتها برای حفظ اعتبار خود سعی مینمایند درحد متوسط صنعت از بدهی در ساختارمالی خود استفاده نمایند. بنابراین الگوهای هر کشوری به عنوان یکی از عوامل برونی مؤثر برساختارمالی شرکتها تلقی میشود. (چاندر، ۱۹۹۰)
بعداز بررسی عمدهترین عوامل درونی و برونی مؤثر بر ساختارمالی، لازم است مروری کوتاه بر تاریخچه بورس در جهان وهمین در ایران داشته باشیم. تا اینکه شناختی نیز از بورس اوراق بهادار تهران وفعالیت های آن بوجود آید.
۲-۲-۳ بخش سوم: عوامل مؤثر براهرم مالی شرکتها
از بین عوامل درونی و بیرونی مؤثر بر ساختار مالی (اهرم مالی) شرکتها در این پژوهش از ۸ عامل متغیر داراییهای وثیقهای شرکت، سودآوری شرکت، نرخ موثر مالیات شرکت، سپر مالیاتی غیربدهی شرکت، اندازه شرکت، نرخ رشد شرکت، تعداد شرکتهای تابعه و شاخص صنعت استفاده شده است، که به شرح زیر مورد بررسی و مطالعه قرار میگیرد:
۲-۲-۳-۱) داراییهای وثیقه:
یکی دیگر از عوامل تعیین کننده ساختار مالی شرکت ساختار دارایی میباشد. شرکتهایی که داراییهای آنها وثیقه مناسبی برای وام هستند، از بدهی و وام بیشتری استفاده میکنند. از طرف دیگر از دیدگاه وام دهندگان نیز شرکتهایی که قسمت اعظم داراییهای آنها دارایی مشهود و قابل وثیقه باشد، برخی ریسکها را که وام دهندگان با آنها روبروست را کاهش میدهد. به دلیل اینکه ارزیابی ارزش داراییهای مشهود برای وام دهندگان نسبت به ارزیابی داراییهای غیر مشهود آسانتر است و ثانیاً شرکتهایی که قسمت اعظم داراییهایشان دارایی مشهود است مشکلتر میتوانند سرمایه گذاریها را به سمت سرمایه گذاریهای ریسکی انتقال دهند. بنابراین هرچه در ساختار داراییهای مشهود که قابل وثیقه گذاشتن باشد، بیشتر باشد، تمایل وام دهندگان به دادن وام بیشتر است. این نتیجه گیری براساس تئوری تضاد منافع بین وام دهندگان و سهامداران مطرح شده است. این تئوری بیان میکند که تضاد منافع بین وام دهندگان و سهامداران، تشویقها و انگیزههایی برای سهامداران ایجاد میکند که به طور ریسکیتری سرمایه گذاری کند و وام دهندگان جهت مصون کردن خود از این ریسکها به داراییهای مشهود که به عنوان وثیقه جهت اعطای اعتبار به شرکت، نیاز بیشتری دارند.(ساکسانگ ۲۰۰۴)
بنابراین میتوان گفت که هر چه داراییهای شرکت که قابل وثیقه شدن است بیشتر باشد شرکت قادر به تحصیل وام و اعتبار بیشتری خواهد بود. لازم به یادآوری است که داراییهایی مانند داراییهای نامشهود، مخارج انتقالی به دوره های آتی و سایر داراییها معمولاً قابل وثیقه شدن نیستند.
جهت ارزیابی داراییهای مشهود قابل وثیقه از نسبت داراییهای ثابت به کل داراییها استفاده میشود. در زمان ورشکستگی داراییهای غیر قابل مشاهده زودتر از داراییهای قابل مشاهده از بین میروند، بنابراین بنگاههایی که داراییهای قابل مشاهده بیشتری دارند امکان استفاده از وام بیشتری را نیز دارند.
۲-۲-۳-۲) سودآوری:
بر مبنای تئوری که در سال ۱۹۸۴ توسط مایرز و ماجلوف بیان شد شرکت ها در انتخاب تصمیمات تأمین مالی یک سلسله مراتبی را رعایت میکنند. به این ترتیب که شرکتها وجوه داخلی را به وجوه خارجی ترجیح میدهند و در ابتداء از محل سود انباشته، سپس از محل بدهی و درنهایت از طریق انتشار سهام و یا اوراق بهادار دو منظوره (مثل اوراق قرضه قابل تبدیل) جهت تأمین مالی طرحهای سرمایه گذاری اقدام مینمایند. این رفتار ممکن است به دلیل هزینه های انتشار اوراق بهادار جدید، هزینه معاملات و یا نتیجه اطلاعات نامتقارن و چندگانه باشد. بنابراین براساس نظریه فوق هرچه سودآوری بیشتر باشد شرکتها قادر به انباشتن سود بیشتر خواهند بود و درنتیجه برای سرمایه گذاریهای جدید خود از محل سود انباشته اقدام خواهد نمود. لذا ارتباط منفی بین سودآوری و اهرم مالی وجود دارد.
با این وجود در خصوص نحوه تأثیر سودآوری بر روی اهرم مالی تضادهایی وجود دارد. بطوری که برخلاف نظریه مایرز و برالی در سال ۱۹۸۶ جنسون یک رابطه مثبتی را بین اهرم و سودآوری به شرط وجود بازار مؤثر بر شرکت بیان میکند و درصورتیکه بازار غیرمؤثر باشد یک رابطه منفی بین سودآوری و اهرم را بیان میکند (جنسون ۱۹۸۶) و راژان وزینگالس در سال ۱۹۸۸ نیز این رابطه را تأیید کردهاند.
معیارهایی که جهت اندازه گیری سودآوری شرکتها به کار میرود عبارتند از:
نسبت سود قبل از بهره و مالیات به کل داراییها
نسبت سود قبل از بهره و مالیات به کل فروش
و در این پژوهش از نسبت سود قبل از بهره و مالیات به کل داراییها استفاده کردهایم
۲-۲-۳-۳) نرخ موثر مالیات:
از آنجایی که برخی فعالیتها مانند کشاورزی و دامپروری و… معاف از مالیات میباشند و برخی شرکتها به دلایلی خاص از معافیتهای مالیاتی خاصی برخوردار میباشند لذا مقدار مالیات آنها نسبت به کل سود آنها از نرخ مالیاتی مصوب متفاوت خواهدبود.
۲-۲-۳-۴) سپر مالیاتی غیربدهی:
منظور از سپر مالیاتی هزینههایی است که باعث خروج پول و ثروت از شرکت نمیگردد و یا به بیان دیگر هزینه های غیر نقدی هستند و سپرمالیاتی غیربدهی منظور هزینه استهلاک است که در شرایط تورمی نیز به دلیل تجدید ارزیابی بیشتر خواهد شد و افزایش هزینه استهلاک باعث کاهش مالیات خواهدشد.
۲-۲-۳-۵) اندازه شرکت:
منظور از اندازه شرکت عبارت است از حجم فروش، حجم داراییها، حجم سرمایه و میزان فعالیت یک شرکت. بنابراین نکته مهم در سنجش اندازه شرکت این است که چه عاملی به عنوان ملاک و معیار، مورد استفاده قرار گیرد، تا از آن طریق به شکل صحیح و دقیق شرکتها را از نظر اندازه وحجم از یکدیگر تفکیک نمایند. لذا مساله مهم در اندازه شرکت، مقیاس و ملاک سنجش اندازه شرکتها می باشد. معیارهای متفاوت، ولی مرتبط با یکدیگر، برای اندازه گیری حجم و گسترش فعالیت شرکتها مورد استفاده قرار گرفته است.
۲-۲-۳-۶) نرخ رشد: