Antitumor&enzyme inhibitory

Streptomyces parvulus

Manumycin

Antitumor

Streptomyces globisporus

Landomycin E

هدف از پژوهش
باتوجه به شیوع و گستردگی سرطان همچنین مقاومت‌های دارویی دیده شده در شیمی درمانی، نیاز به داروهای شیمی درمانی سرطان جدید و شناسایی منابع جدید تولید کننده‌ی داروهای ضد سرطان امروزه هرچه بیشتر احساس می شود. از سوی دیگر اکتینومیست‌ها به دلیل توانایی‌های بیوسنتزی بالا در تولید ترکیبات دارویی از جمله داروهای ضدسرطان مطرح بوده‌اند، به دلیل تاریخچه موفقیت آمیز این گروه از باکتری‌ها در تولید داروهای ضد سرطان، این گروه از باکتری‌ها به‌عنوان منبعی مناسب برای تولید ترکیبات ضدسرطان انتخاب شدند. در این تحقیق تلاش می‌‌شود تا به منابع خاکی تولید آنتی‌بیوتیک‌ها ضد سرطان توجه‌ شود زیرا خاک مهمترین منبع برای جداسازی میکروارگانیسم‌ها است، چرا که جمعیت میکروبی بالاتری را نسبت به هر زیستگاه دیگری دارا می‌باشد. همچنین در این تحقیق تلاش می‌شود تا اکتینومیست‌های بومی ایران موجود در کلکسیون میکروارگانیسم‌های دانشگاه تهران (UTMC) به عنوان منبع غنی از ترکیبات دارویی از نظر تولید ترکیبات ضد سرطان مورد غربالگری وشناسایی قرار گرفتند.

( اینجا فقط تکه ای از متن پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

همچنین با توجه به آمار ارائه شده در زمینه‌ی سرطان ریه چه در بعد جهانی و چه در ایران و اهمیت این سرطان و نیز افزایش روز افزون مبتلایان به انواع سرطان‌ها و از جمله سرطان ریه، در این پژوهش تلاش بر آن شد تا اثرات سیتوتوکسیک متابولیت‌های ثانویه‌‌ی اکتینومیست‌ها به روی دودمان سلول سرطانی ریهA549 مورد بررسی قرارگرفت.
فصل دوم :
پیشنه‌ی تحقیق
بین سال‌های ۱۹۴۵-۱۹۶۵ بسیاری از داروهای مهم شیمی درمانی توسعه یافتند و فعالیت‌های ضد‌توموری را در آزمایش‌های بالینی از خود نشان دادند که در میان آنها ترکیباتی مانند Actinomycin D که توسط اکتینومیست‌ها تولید می‌شود نیز وجود داشت. بین سال‌های ۱۹۶۵-۱۹۷۵ سرعت کشف داروهای جدید و توسعه‌ی آنها ادامه یافت (۱۶). در اوایل دهه ۶۰ میلادی ترکیب Daunomycin(daunorubicin) از سویه‌ی Streptomyces peucetius, var. caesius جداسازی و تخلیص شد که این ترکیب برای لوکمی موثر بود. از دیگر ترکیبات که از گروه اکتینومیست‌ها به دست آمده‌اند و امروزه نیز کاربرد دارند می‌توان بهMitomycin C، Bleomycin، Doxorubicin اشاره کرد (۵۱).
میتومایسین‌ها در اواخر دهه ۱۹۵۰ در ژاپن کشف شدند و یکی از آن‌ها به نام Mitomycin C به سرعت جای خود را در میان دیگر ترکیبات ضد سرطان باز کرد، همچنین استرپتوزوسین در سال ۱۹۶۰ از Streptomyces achromogenes جدا شد.
دانوروبیسین که ازStreptomyces coerulerubidus وStreptomyces peucetius به دست می‌آید. علیه لوکمی فعالیت دارد وکاربرد بالینی پیدا کرده است با این حال با کشف دوکسوروبیسین از Streptomyces peucetiusvar.caesius از اهمیت آن کاسته شد در ادامه در سال ۱۹۷۸ دانشمندان جداسازی CC-1065 را از Streptomyceszelensisگزارش کردند.
کشف بلئومایسین در سال ۱۹۹۶ نتیجه‌ی تحقیقاتی بود که اومزاوا^[۶۳] برای آزمایش کشت‌های فیلتر شده‌ی میکروبی علیه تومورهای انجام داد (۲).
تلاش‌هایی نیز برای بهبود شرایط کشت و بازده بهتر تولید این داروها انجام شده که به چند نمونه از آنها نیز اشاره می‌شود:
کاتز^[۶۴]وهمکاران در سال ۱۹۵۹ تحقیقاتی را در رابطه با بیوسنتز کنترل شده اکتینومایسین با سارکوزین انجام دادند، که نتایج این تحقیق نشان می دهد که حضور سارکوزین کمک به افزایش تولید اکتینومایسین می کند (۳۳).
گالو^[۶۵] و همکاراندر سال ۱۹۷۲نیز بر روی بهینه سازی شرایط تولید اکتینومایسین تحقیقاتی را انجام دادند که نتایج آنها نشان می داد تا زمانی که مقدار گلوکز در محیط به ۱/۰%نرسد تولید تر کیبات متابولیت ثانویه بهطور مشخص اکتینومایسین آغاز نمی شود (۲۵).
امروزه نیز به علت شیوع سرطان و مقاومت های دارویی این بیماری تلاش‌هایی برای شناسایی داروهای جدید و منابع آنها در حال انجام است که به چند مورد از آنها اشاره می شود.
Cheol و همکاران در سال۲۰۱۰توانستندیک باکتری ازخانواده Streptomycetaceae که توانایی تولید ترکیبات نیتروپیرولین‌های A-E : فارنسیل-α-نیتروپیرول را دارد شناسایی کنند. این ترکیب اثرات سیتوتوکسیک را دارا بود و باکتری مولد آن درخانواده اکتینومیست قرار داشت (۲۲)، همچنین Li وهمکاران در سال ۲۰۱۱اعلام کردند که یک آنالوگ استاروسپورین جدید از Streptomycessp.172614 را کشف کرده‌اند (۴۲).
Shaaban وهمکاران در سال ۲۰۱۱ توانستند لندومایسین‌های P-W، که اثرات سیتوتوکسیک داشتند را ازStreptomyces cyanogenus S-136 جدا سازی کنند (۵۴).
Schleissnerوهمکاران در سال ۲۰۱۱ توانستند آستینوپیرانول‌های آنتی‌تومور تولید شده توسطPOR-04-15-053Streptomyces albus را بدست آورند (۵۳).
تمامی این ترکیبات بدست آمده از خانواده Actinomisetal می باشند و خاصیت سیتوتوکسیکی آنها به روی یک دودمان‌ سلول سرطانی و ازجمله دودمان سلول‌های سرطانی ریه به اثبات رسیده است. در ادامه به فعالیت‌هایی که درایران در این زمینه انجام شده اشاره می شود.
در سال ۱۳۸۱ بررسی‌هایی به روی نرمتنان خلیج فارس توسط شیلا صفائیان و همکاران انجام شد که نتیجه‌ی آن به دست آوردن یک سویه‌ی جدید از خانواده اکتینومیست‌ها بود که اثرات سیتوتوکسیک عصاره آن به کمک تست آرتمیا بررسی شد و این سویه دارای اثرات کشندگی بود (۶).
همچنین صفائیان و همکاران در پژوهشی دیگر باکتری Streptomyces griscoloalbus را از نرم تنان خلیج فارس جدا کردند و اثرات سیتوتوکسیک آن را به روی رده سلولی اپیدرموئید سلول‌های دهان^[۶۶] مورد مطالعه قرار دادند (۵).
اما تاکنون اطلاعاتی در زمینه بررسی و غربالگری منابع تولید ترکیبات سیتوتوکسیک به وسیله‌ی اکتینومیست‌های خاکزی در ایران گزارش نشده است.
فصل سوم :
مواد و روش‌ها
مواد و تجهیزات استفاده شده در این پژوهش
ترکیبات استفاده شده
در جدول ‏۳‑۱ اطلاعات مربوط به مواد به‌کار برده شده در این پروژهش آورده شده است.
جدول ‏۳‑۱:مواد شیمایی استفاده شده

مواداستفاده شده

شرکت تولید کننده

عصاره مخمر

Merck

عصاره مالت