۵-۲ روش زمانبندی پیشنهادی
همانطور که در فصل­های قبل گفته شد در ابر سه لایه (SaaS, PaaS, IaaS) وجود دارد. نظارت بر ابزار کاری چالش برانگیز است، چرا که سنجه­های نظارت در سطح زیرساخت و بستر نمی ­توانند به راحتی به سنجه­های نظارت در سطح ابزار نگاشت شوند و از طرفی ممکن است چندین ابزار VMهای مشابهی را به اشتراک بگذارند یا یک ابزار روی چندین VM اجرا شود (مثل ابزارهای موازی یا ابزارهای توزیع شده). در این پایان نامه به لایه SaaS توجه شده است که به کاربران اجازه دسترسی به ابزارهای کابردی از طریق اینترنت را می­دهد. هدف عمومی فراهم­کنندگان SaaS کاهش هزینه و افزایش سطح رضایت مشتریان است. هزینه شامل هزینه زیرساخت، هزینه عملیات مدیریتی و جریمه ناشی از نقض SLA است.
سطح رضایت مشتریان بستگی به میزان رعایت SLA دارد. کاربران درخواست­های خود را به لایه SaaS می­ دهند و فراهم­کنندگان این لایه به منظور تحویل سرویس­های درخواستی یا باید منابع خود را به مشتریان اجاره دهند و یا منابع را از لایه IaaS اجاره کرده و سپس آنها را به مشتریان ارائه کنند. اگر از منابع SaaS استفاده شود هزینه­ های مدیریتی و نگهداری را به دنبال دارد و اگر منابع از IaaS گرفته شوند مسائل مربوط به کیفیت سرویس مطرح می­شوند. برای استفاده موثر از منابع باید مواردی را مورد بررسی قرار داد که برخی از آنها در ادامه مطرح شده ­اند.

( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

آیا می­توان درخواست جدیدی را پذیرفت بدون اینکه روی درخواست­های از قبل پذیرفته شده تاثیر گذاشته شود؟
چگونه درخواست­های متفاوت یک مشتری یا درخواست­های مشتریان مختلف با QoSهای متفاوت به VMها نگاشت شوند؟
چه منابعی بهتر است تخصیص داده شوند؟ آیا راه ­اندازی VM جدید مناسب است؟
روش زمانبندی پیشنهادی در این پایان نامه برای استقرار درخواست­های کاربر روی VMهاست. همانطور که گفته شد درخواست­هایی که توسط کاربر ارائه می­شوند از نظر اولویت، بارکاری و پارامترهای SLA در سطح یکسانی قرار ندارند. از نظر اولویت در یک تقسیم ­بندی می­توان گفت اگر کاربر نیاز به پردازش داده یا کارهای امنیتی داشته باشد آن درخواست به عنوان درخواست اولویت بالا و اگر درخواست، اجرای وظایف غیر بحرانی باشد به عنوان درخواست اولویت پایین کلاس بندی می­ شود. در بسیاری از الگوریتم­هایی که در فصل­های قبل مرور شدند درخواست­ها اولویتی نسبت به هیچ یک از درخواست­های پذیرفته شده قبلی نداشتند. این عدم انعطاف­پذیری روی سود تاثیر می­ گذارد، زیرا بسیاری از درخواست­های ضروری رد می­شوند، بنابراین در الگوریتم پیشنهاد شده در این پایان نامه درخواست­ها به دو دسته اولویت بالا و پایین تقسیم ­بندی شده ­اند و به تمام درخواست­ها به ترتیب ورودشان منابع تخصیص داده می­شوند.
در صورت لزوم درخواست­های پذیرفته­شده قبلی، مجدد زمانبندی می­شوند تا بتوان درخواست­های فوری را پذیرفت. مزیت این الگوریتم این است که فراهم­کننده SaaS کاربران بیشتری را با بکارگیری سودمند VMهای شروع­شده می­پذیرد و سود بیشتری بدست می ­آورد. در روش پیشنهادی اگر درخواست با اولویت بالایی وارد شود و منابع کافی روی VMهای در حال اجرا وجود نداشته باشند، منابع از VMای که همه درخواست­هایش دارای اولویت پایین است گرفته شده و به درخواست با اولویت بالا داده می­ شود و برای درخواست­هایی که منابعش گرفته شده تخصیص مجدد صورت می­گیرد، یک شمارنده برای درخواست­ها در نظر گرفته شده است که مقدار اولیه آن صفر است. چنانچه مقدار این شمارنده غیر صفر باشد یعنی نقض SLA صورت گرفته است. درخواست­ها در VMای که حداقل فضای خالی را دارند قرار داده می­شوند تا استقرار به صورت bestfit انجام شود.
۵-۲-۱ شرح الگوریتم
شکل ۵-۱ الگوریتم پیشنهادی را نشان می­دهد. در ادامه الگوریتم پیشنهادی تشریح شده است. ورودی و خروجی الگوریتم و اینکه هر بخش از الگوریتم چه کار خاصی را انجام می­دهد مشخص شده است.
ورودی (خط­های ۱-۳): شامل درخواست جدید، لیست VMهای درحال اجرا در مرکز داده و لیست منابع سراسری موجود در مرکز داده می­باشد. وقتی کاربر درخواستی می­دهد علاوه بر پارامترهای SLA، اولویت درخواست نیز بر اساس پارامتر α که توسط کاربر مقداردهی می­ شود دریافت می­ شود.
خط ۴: برای درخواست ورودی شمارنده­ای در نظر گرفته شده است که در ابتدا با صفر مقداردهی شده است. زمانیکه درخواستی با توجه به مهلتش نتواند منابع مورد نیازش را دریافت کند پذیرفته نمی­ شود و شمارنده­اش افزایش میابد و برایش تخصیص مجدد صورت می­گیرد. چنانچه مقدار شمارنده غیر صفر باشد یعنی نقض SLA صورت گرفته است. به عنوان مثال اگر درخواست با اولویت پایینی یکبار رد شود شمارنده­اش یک می­ شود و باید برایش تخصیص مجدد صورت گیرد. در تخصیص مجدد این درخواست، درخواست با اولویت بالا تلقی می­ شود. از آنجائیکه اساس کار الگوریتم این است که در صورت کمبود منابع برای اجرای درخواست با اولویت بالا منابع از درخواست با اولویت پایین گرفته شود شمارنده به این منظور استفاده شده است که درخواست با اولویت پایین همواره رد نشود. اگر شمارنده صفر نباشد جریمه­ توسط فراهم­کننده پرداخت می­ شود. برای درخواست­های با اولویت پایین کاربر غرامتی را دریافت می­ کند و این رد شدن درخواست را می­پذیرد.
خط ۵: نوع درخواست بررسی می­ شود. اگر α صفر باشد یعنی درخواست اولویت پایین دارد.

SLA-Based Scheduling

۱-Input: NewVMReq
۲-Get GlobalRes && AvailableVMList
۳-Get α //it shows request priority (if NewVMReq has High-priority then α=۱, else α=۰)
۴-{ Counter=0
۵- IF (α=۰) THEN //low priority request
۶- { IF (there is initiated VM_i) THEN
۷- { FOR (each initiated VM_i) DO
۸- {IF (VM_i has free space) THEN
۹- put VM_i into AvailableVMList
۱۰- }
۱۱- Sort AvailableVMList according to the available free space
۱۲- Schedule to process and deploy NewVMReq on VMMin that has minavailablespace
۱۳- }
۱۴- Else { Put NewVMReq in waiting Queue
۱۵- IF (NewVMReq’ deadline is finished) THEN
۱۶- { counter ++
۱۷- Return reject
۱۸- Repeat step 23-47
۱۹- }
۲۰- Else Repeat step 6-47
۲۱- }
۲۲- }
۲۳- Else IF (α=۱) THEN // high priority request
۲۴- { FOR (each initiated VM_i) DO
۲۵- { IF (VM_i has free space) THEN
۲۶- put VM_i into AvailableVMList
۲۷- }
۲۸- Sort AvailableVMList according to the available free space
۲۹- Schedule to process and deploy NewVMReq on VMMin that has minavailablespace
۳۰- }
۳۱- Else IF (there is any initiated VM_i whitch all of it’s requests have α=۰) THEN
۳۲- { FOR (each initiated VM_i) DO

(چون به آنها گفته شود: پروردگارتان چه چیز نازل کرده است ؟ گویند: افسانه های گذشتگان).
همچنین واژه اسطوره در “اوستا” به معنای دروغ بکار رفته است. در اوستا “میث” به معنی دروغ و “میثَ اوخته” به معنای گفته ی دروغین است؛ در پهلوی به ” میتُخت” و “دروغ گوشن” برگردانده شده است. در یونانی ، “میث، موث” به معنای افسانه و داستان ، از این واژه اوستایی و “موئولوگیا” (انگلیسی mythology) درست برگردانده میتخت استو در عربی، به گونه های “متوع” : دروغ گفتن؛ “مذاع” : دروغگو ؛ “مذیذ” : دروغگویی راه یافته است.^[۵]

تعاریف اسطوره
در تعریف واژه اسطوره ، با آنکه بسیار گفته اند و نوشته اند اما تعریف دقیق، واضح و روشنی ندارد. برخی این واژه را به معنای افسانه و تاریخ کاذب گرفته اند، یعنی به معنای داستانی درباره ی رویدادی در گذشته که ما آن را نادرست بدانیم. وقتی می گوییم فلان واقعه، اساطیری است معنی اش این است که آن واقعه هرگز روی نداده است. ولی اسطوره در حکمت الهی معنائی دیگر دارد و عبارت است از وسیله ضبط رموز دینی و نشان دادن حقایق نادیدنی به شکل چیزهای دیدنی. این تعریف همانند آن نظر متداول میان انسان شناسان است که می گویند؛ اسطوره، داستانی مقدس است.” ^[۶]در بسیاری از تعابیر و تفاسیر از واژه اسطوره را اگر به دو بخش کنیم، تضاد در تعاریف بهتر نمود می یابد.
{نخست تعریف علمای اسطوره شناس معاصر که در آن معنایی رمزی می یابند و دو دیگر تعریف مرسوم و متداول تا زمان حاضر که آن را “بی معنی” پنداشته است، یا درست بگویم بعضی از واژه اسطوره (myth) فقط داستانی موهوم (fiction fable) مراد می کنند.}^[۷]
واژه اسطوره در میان دانش های اجتماعی ، مردم شناسی توجه بیشتری را به خود جلب کرده است و هر کدام از گونه های مردم شناسی، از دیدگاه تحول گرایی، اشاعه گرایی، کارکرد گرایی و ساخت گرایی تعریف و تحلیل خاصی از اسطوره ارائه کرده اند^[۸]. در ادامه به تعدادی از تعاریف دانشمندان که به نوعی به اسطوره پرداخته اند، می پردازیم.
اسطوره از نگاه برخی نظریه پردازان غیر ایرانی
میرچاالیاده ( mirca eliade)
الیاده اسطوره را نقل کننده سرگذشتی قدسی و مینوی می داند، و راوی واقعه ای که در زمان آغازین همه چیز (زمان اولین) رخ داده است. وی اسطوره را متضمن روایت یک خلقت برمی شمرد. خلقتی که بیان می کند چگونه چیزی پدید آمده ، موجود شده و هستی خود را آغاز کرده است. الیاده اسطوره را چیزهایی می داند که واقعاً روی داده اند و به تمامی پدیدار گشته اند^[۹]. وی جوهر دین را اساطیر می داند ، و برآمده از تجربه های اصیل دینی می انگاشت و آنها را از داستانهای مینوی و حدیث واقعیت ها می دانست که اصیل و پیدایش جهان و جانوران و گیاهان و انسان و همه ی “وقایع اولین و اصلی” جهان را بیان می کنند. او می گفت: دنیای باستان دارای شکل های گوناگونی از دین و باورهای دینی بودند که
همزمان و همراه هم وجود داشتند، مانند انواع تک خدایی و چند خدایی، به هر دو صورت نرینه و مادینه ی چیره گر، پرستش طبیعت و پرستش نیاکان، تجربه ی دینی مقدس به اساطیر ساخت و کارکردی سودمند می داد. در بررسی زمینه های متعدد تجربه ی دینی، مانند طبیعت خدایان، اساطیر آفرینش، قربانی ها، آیین ها، مرگ و بهشت شباهت ها و ارتباط های زیادی میان فرهنگ ها آشکار می گردد. “
ماکس مولر (max muller)
ماکس مولر و پیروانش “اساطیر را فراورد دوره بیماری زبان می دانستند و شیوه درست شناخت اسطوره ها و دریافت درست معنای آنها را از راه بررسی و تحلیل زبان اسطوره ها می پنداشتند.آنان میان زبان و اسطوره یک وحدت واقعی و ریشه مشترک قایل بودند و اعتقاد داشتند که زبان، ماهیتی منسجم و منطقی و اسطوره به ظاهر ، ماهیتی نامنسجم و بی قاعده و نظم دارد.” ^[۱۰]
“جمله مشهور او این است که اساطیر یک بیماری زبان است. در دورانی که زبان برای بیان مفاهیم مجرد هنوز توانایی نداشته است، از پدیده های جوی، آسمانی، خورشیدی و … خدایانی ساخته شده است و بعدها در اثر جابجایی فرهنگ ها اسطوره هایی از آنها پرداخته شده است. “^[۱۱]

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

در نظریه مولر، ارتباط و حلقه اتصال زبان و اسطوره، واژه است و معانی متعددی که از آن پدید می آید و حلقه رابط میان اسطوره و واژه را استعاره (metaphor) می داند که در ذات و کارکرد زبان ریشه دارد و تخیل را سمت و سو می دهد و به تصویر و هیئت های اسطوره در می آید و به اسطوره می انجامد. وی شکل گیری اسطوره را نتیجه ضروری و ذاتی زبان بیان می کند “اگر زبان را به منزله شکل بیرونی اندیشه بشناسیم ،اسطوره سایه تاریکی است که زبان براندیشه می اندازد و تا هنگامی که سخن و اندیشه کاملاً بر هم منطبق نباشند که هرگز هم بر هم منطبق نخواهند شد، این سایه تاریک (یعنی اسطوره) ناپدید نخواهد شد. اسطوره در عالی ترین معنای خود قدرتی است که زبان در هر قلمرویی از فعالیت فرهنگی بر اندیشه اعمال می کند در نظر مارکس مولر “هم ریشه بودن” (paranymy) یعنی به کار بردن یک واژه برای رساندن و بیان کردن تصورات کاملاً متفاوت، کلید تفسیر اساطیر است.” ^[۱۲]
ارنست کاسیرر (Ernest Cassirer)
کاسیرر از انسان به عنوان جانور سنبل ساز (animal symbolicum) نام می برد.^[۱۳] “این تعریف، هر دو تعریف ارسطو از انسان را در برمی گیرد. ارسطو انسان را جانوری عقلانی و نیز جانوری
اجتماعی تعریف کرده بود. کاسیرر معتقد است که تعریف نخست؛ یعنی انسان به عنوان جانور عقلانی بسیار تنگ و محدود است و تعریف دوم که انسان را جانوری اجتماعی می داند، تعریفی بسیار گسترده و فراخ است. خصلت اجتماعی حیات انسان باید با رجوع به زبان ، اسطوره، هنر، دین و علم به عنوان “عناصر و شرایط تشکیل دهنده” این شکل عالی ترین جامعه مشخص و معین شوند.”^[۱۴]
کاسیرر اسطوره را وجود بی واسطه و تاثیر بی واسطه می داند^[۱۵]، و ارتباطی که میان اسطوره و اشیا برقرار می شود را ارتباطی منطقی نمیداند که “وقتی میان اشیا قرار گرفتند آنها را از یکدیگر ممتاز کنند و نیز به یکدیگر مرتبط نمایند، بلکه برعکس، روابط اسطوره ای مانند نوعی چسبند که می توانند ناجورترین عناصر را به هم بچسبانند”^[۱۶] کاسیرر اسطوره را شکلی از تفسیر می داند که قائم به ذات است و با آنکه از عناصر ذهنی بهره می برد ولی خود را بیان می کند.^[۱۷]
کاسیرر اسطوره ، هنر، زبان و علم را به گونه نماد می داند “نماد نه به معنای صورت محضی که به کمک اشارات و ترجمان تمثیلی بر واقعیت محققی دلالت می کند بلکه به مفهوم نیروهایی که هر یک از آنها جهانی از آن خویش را می سازند پس صورت های خاص نمادین نه تقلیدهای واقعیت بلکه اندام های واقعیت اند، زیرا تنها بواسطه آنهاست که هر چیز واقعی به یک موضوع دریافت عقلی تبدیل می گردد و بدین سان به فهم ما در می آید.”^[۱۸]
اندرو لانگ (Andrew lang)
لانگ از جمله کسانی است که ” به علت شناختی در اساطیر معروف است و بر این نظریه است که تمام اساطیر یک علت یا توضیح یا چیزی در دنیای واقعی را با دلیل بیان می کنند.
نورتروپ فرای (Northrop frye)
فرای ادبیات را نشات گرفته از اساطیر می داند و اسطوره را اینگونه تعریف می کند. اسطوره “کوشش ساده و ابتدایی تخیل برای این همانی (همانندی) جهان بشری با جهان غیر بشری است و غالباً داستانی درباره یک رب النوع است. بعدها اساطیر بتدریج با ادبیات عجین و اسطوره اصل اساسی از داستان سرایی می شود.”^[۱۹]
زیگموند فروید (Sigmund freud)
فروید و پیروان او در مکتب روانکاوی اسطوره را “نمادی از زیست – بومی درونی ذهن ناهوشیار تفسیر می کردند و ریشه آن را در پویش های روان – جنسی بشر و توجیه کننده آرزوهای ناخودآگاه، ترس ها و میل جنسی می دانند.”^[۲۰] فروید اساطیر را همانند رویاها می دانست که ته مانده های تغییر شکل یافته تخیلات، امیال اقوام و رویاهای متمادی بشریت اند.
در پاسخ به اینکه اسطوره ها از کدام بخش ذهن فرا فکنده می شوند، فروید به ناخودآگاه انسانی اشاره می کرد و آن را نهانخانه ای تصور می کرد که رویاهای جنسی در آن ذخیره می گردد و ذهن خودآگاه از آن بی خبر است و نتیجتاً اساطیر در نظر فروید برآمده از جنسیت اند.
زیگموند فروید رویاها را بازتاب عقده های جنسی میدانست که از دوران کودکی نشأت می گیرند اما یونگ ( از شاگردان فروید) بر آن بود که “نمادها در رویاها بسیار بغرنج تر و پرمعناتر از آن هستند که تنها به کام های جنسی سرکوفته بازگردند.”
کارل گوستاو یونگ
یونگ نمادهای رویا را در سرشت و بنیاد فردی می دانست. یونگ در پاره ای موارد با نظر فروید اندیشه ای متفاوت پیدا کرد. وی و پیروانش بر این باور بودند که ” اساطیر نمایانگر درون مایه ناخودآگاه جمعی هستند که با صورت های مثالی مادر ، کودک، قهرمان، نیرنگ کار وغول درمی آیند. اینها همه قالب های صوری ذهنیتی ساده هستند و تجربیات زندگی فردی تعیین می کند که این صور ذهنی مثالی در چه شکلی تبیین گردند”.^[۲۱]
این گروه می گویند اساطیر همه ی جهان، مضامینی مشابه دارند که بازتابنده ی ناخودآگاه جمعی واحد و مشترک هستند. اسطوره ها در شیوه عملکرد خود، تاثیر محیط فیزیکی، اجتماعی، اقتصادی و سیاسی هر فرهنگ را در نمونه های مثالی نشان می دهند. به گمان وی همانگونه که رویاها بیانگر آرزوهای پنهان آدمی هستند اسطوره نیز می تواند بیانگر آرزوها، ترس ها، امیدهای یک قوم یا جامعه باشد.^[۲۲]
به زعم وی درون ناخودآگاه جمعی انسان ها یا رویاهای جمعی بشری ، نمادهایی وجود دارند که در وسعت فرهنگی انسان و با گوناگونی فراوان خود بازتاب و کارکرد یکسان دارند. نمادهایی که خاستگاهشان ناخودآگاه جمعی انسانی است و کالبدهایی هستند که بصورت کهن نمونه ها، پیکره و شکل می پذیرند و نمود می یابند.^[۲۳]
اسطوره از نگاه برخی نظریه پردازان ایرانی
مهرداد بهار
بهار اسطوره را اینگونه تعریف می کند: “اسطوره اصطلاحی کلی است و در برگیرنده باورهای مقدس انسان در مرحله خاص از تطورات اجتماعی که در عصر جوامع باصطلاح ابتدایی شکل می گیرد و باورداشت مقدس همگان مقدس همگان می گردد.”^[۲۴] نظر بهار در این است که هر اندیشه و گفتار و دیدگاهی به نوعی خاص ، اسطوره را تعریف می کند و هر کدام یک ویژگی از اسطوره را درنظر دارند بنابراین تلفیقی از تئوری ها، نظرها و تعریف ها م یتواند دیدگاهی صحیح تر و محتاطانه تر را بیان کند و اضافه کند ” اساطیر مجموعه ای است از تاثیرات متقابل عوامل اجتماعی – انسانی و طبیعی که از صافی روان انسان می گذرد، با نیازهای مختلف روانی – اجتماعی ما هماهنگ می گردد و همراه با آیین های اجتماعی خویش ظاهر می شود و هدف آن پدید آوردن سازشی و تعادلی بین انسان و پیچیدگی های روانی او با طبیعت پیرامون خویش است.”^[۲۵]
جلال ستاری
جلال ستاری اسطوره را اینگونه تعریف می کند: “به گمان من آنکه با اسطوره زندگی نکند اصلاً وجود ندارد . ما به عشق معتقد هستیم آنگاه که شیفته کسی می شویم ، برای او تألی نمی شناسیم. این اسطوره است. این باور که آن را که دوستش دارم فقط همین است و جز این نیست از مقوله اسطوره بشمار می آید. شهادت از مقوله اسطوره است. کدام قومی است که با فکر شهادت زندگی نمی کند؟ و این باور که شهید زنده ی جاوید است از مقوله اسطوره می آید. سر و راز انتظار، از مقوله اسطوره است. ^[۲۶]
جلال ستاری در مقدمه معانی متعددی که از اسطوره مستفاد میشود را ذکر میکند:

1. 1. آنچه از اسطوره معنایی رمزی در میابد. که در این معنی اسطوره معنایی مثبت دارد و کاربرد آن نظم بخشیدن و معنا دادن به اموری است که بعلت ناشناس بودن علل واقعی آنها معلوم بشر نیست.

1. 1. اسطوره، به معنای قصه و داستانهای موهوم که در این معنی بارمنفی دارد و جز خیال پردازی پوچ و گمراه کردن ذهن هدفی ندارد.^[۲۷]

ستاری اسطوره را بعنوان عنصری معنا بخش و هویت ساز چنین اصلاح میکند، که« شرط رشد و دوام هر فرهنگ و لاجرم لازمه ی شناخت هویت فرهنگی خویش ، وجود غیر یا خویشتن دیگری (alter ego) است که متفاوت با ما و رقیبمان باشد؛ و بدینگونه است که هویت ساخته میشود که برخلاف تصور مزمن ، نه بطور طبیعی وجود دارد و نه ثابت و لاتتغیر است، بلکه حقیقتاً ساخته و پرداخته میشود.»^[۲۸]
علی شریعتی
شریعتی اسطوره را جبران کمبود تاریخ می داند؛ ” اساطیر، تاریخی است نه آن چنان که هست بلکه چنان که باید باشد. اساطیر بیان زندگی و وقایع افرادی است برتر از انسان، کاملتر از انسان و هر کدام مظهر کامل و مطلق یکی از مسایل و امور در دنیایی بالاتر از دنیای واقعیت. اساطیر مجموعه ای است از نمونه های عالی هراحساسی، نمونه های عالی هر تقدسی، نمونه های عالی هر جمالی و زیبایی معنوی و مادی، پس نمونه سازی می کند، اما آن چه هست نیست، آن چه باید باشد است.”^[۲۹]

امتیازبندی

۵

۴

۳

۲

۱

۳-۷) روایی^[۸۱] وپایایی^[۸۲] پرسشنامه
۳-۷-۱) روایی(اعتبار)
یکی از مهم­ترین جنبه­ های هرتحقیق، مناسب بودن ابزار اندازه ­گیری آن است. زیرا اطلاعات و داده های لازم جهت تجزیه و تحلیل و نتیجه ­گیری نهایی بوسیله ابزار اندازه ­گیری به دست می ­آید. ابزار اندازه ­گیری در این تحقیق پرسشنامه است. برای سنجش میزان مناسب بودن ابزار اندازه ­گیری(پرسشنامه) دو مولفه سنجیده می­ شود. روایی تعیین می­ کند که ابزار تهیه ­شده تا چه حد مفهوم خاص مورد نظر را اندازه میگیرد.به بیان دیگر روایی به ما می­گوید که آیا مفهوم واقعی(آنچه مدنظر بودهاست)را اندازه می گیریم؟ آزمون­های روایی را در ۳ گروه دسته بندی کرده ­اند که عبارتند از: روایی محتوا^[۸۳]، روایی وابسته به معیار^[۸۴] و روایی سازه^[۸۵] (سکاران، ۱۳۸۰، ۲۲۳-۲۲۲).

( اینجا فقط تکه ای از متن فایل پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

روایی محتوا اطمینان می­دهد که ابزار مورد نظر به تعداد کافی پرسش­های مناسب برای اندازه ­گیری مفهوم مورد سنجش را در بر دارد. هر قدر عناصر مقیاس گسترده­تر و قلمرو مفهوم مورد سنجش را بیشتر در برگیرند، روایی محتوا بیشتر خواهد بود، به بیان دیگر روایی محتوا نشان می­دهد که ابعاد و عناصر یک مفهوم تا چه حد تحت پوشش دقیق قرار گرفته است. روایی ظاهری، یک شاخص ابتدایی و حداقل برای روایی محتوا به شمار می ­آید. این نوع روایی نشان می­دهد که عناصر مورد سنجش به طور ظاهری توانایی اندازه ­گیری مفهوم را دارند.
روایی وابسته به معیار، عبارت است از کارآمدی یک ابزار اندازه ­گیری در پیش ­بینی رفتار یک فرد در موقعیتهای خاص (سرمد و دیگران، ۱۳۷۸، ۱۷۰). پرسشنامه حاضر قبلا در تحقیقات زیادی مورد استفاده قرار گرفته و همچنین مورد ارزیابی و تایید بیش از ده تن از اساتید خبره در این مورد رسیده است. با وجود این‌که روایی محتوایی پرسشنامه قبلاً تائید شده بود اما برای اطمینان بیشتر، نظر چند تن از اساتید خبره در این زمینه و همچنین اساتید راهنما نیز خواسته شد که مورد تائید ایشان نیز واقع شد.
۳-۷-۲) پایایی (قابلیت اعتماد)
یک آزمون، زمانی دارای پایایی است که نمره ­های مشاهده و نمره ­های واقعی آن دارای همبستگی بالایی باشند، به این معنی چنانچه نمره ­های مشاهده شده و واقعی آزمودنی در آزمودن موجود باشد مجذور همبستگی بین این نمره­ها، ضریب پایایی آزمون می­ شود (خاکی، ۱۳۸۶، ۲۹). پایایی یکی از ویژگی­های فنی ابزار اندازه ­گیری(پرسشنامه) است. مفهوم یاد شده با این امر سر و کار دارد که ابزار اندازه ­گیری در شرایط یکسان تا چه اندازه نتایج یکسان به دست می­دهد. کسانی که برای تحلیل داده ­های خود از نرم افزار SPSSاستفاده می­ کنند، می­توانند قابلیت اعتماد ابزار اندازه ­گیری را با روش آلفای کرونباخ محاسبه نمایند، که البته برای آن فرمولی نیز وجود دارد. اما به عنوان یک قاعده‌ی کلی،میزان آلفا دست کم باید۷/۰ باشد (مقیمی، ۱۳۸۶، ۲۹۳). در این پژوهش از ابزار پرسشنامه برای اندازه ­گیری داده‌ها استفاده شده و نیز برای تحلیل داده‌ها، نرم افزار SPSS بکار گرفته شده؛ لذا پایایی پرسشنامه یا قابلیت اعتماد آن با بهره گرفتن از روش آلفای کرونباخ محاسبه شده است که فرمول (۳-۱) آن به صورت رابطه زیر است:
رابطه(۳-۱): فرمول محاسبه آلفای کرونباخ:
معادل نمادهای به کار رفته در فرمول محاسبه آلفای کرونباخ، به شرح زیر است:
r_α : ضریب پایایی؛
j : تعداد زیر مجموعه سوال‌های پرسش نامه؛
S_i² : واریانس زیر آزمون؛
S² : واریانس کل آزمون.
برای تعیین پایایی پرسشنامه این تحقیق از آزمون آلفای کرونباخ استفاده می‌شود. بدین صورت که ابتدا ۳۰ پرسشنامه بصورت تصادفی در بین افراد نمونه انتخابی به عنوان پیش آزمون توزیع گردید و براساس پاسخ‌های آنها، ضریب آلفای کرونباخ بدست آمد. ضریب آلفای کرونباخ برای کل سوالات پرسشنامه برابر ۸۸۴/۰ می‌باشد که بزرگتر از ۷/۰ است، پس سوالات پرسشنامه‌ها از پایایی قابل قبولی برخوردارند. میزان پایایی پرسشنامه‌ها در جدول (۳-۵) زیر آمده است.
جدول ۳-۵ : آلفای کرونباخ پرسش های تحقیق

متغیر‌های تحقیق

ضریب آلفای کرونباخ

تعداد سوالات

سبک رهبری مشارکتی

۹۲۰/۰

۸

سبک رهبری مشورتی

۸۳۷/۰

۵

سبک رهبری خیرخواهانه

۸۰۵/۰

۵

سبک رهبری استبدادی

۸۵۸/۰

کانل استاد افتخاری دانشگاه سیدنی استرالیا و عضو دانشکده‌ی آموزش و پرورش دانشگاه موناش ملبورن است. ریاضیات یکی از درس‌های سنتی است. ویژگی و فایده‌ی ریاضیات این بود که اولاً ذهن را تمرین می‌داد و ثانیاً پایه‌ای برای آموزش علوم ناب فراهم می‌آورد. دروس دیگر شاید اطلاعات جالب و سودمندی در اختیار می‌گذاشت اما کسی آن‌ها را دارای ویژگی‌های آموزش اصولی درسی مانند ریاضیات نمی‌دانست. (کانل، ۱۳۶۸، ۷)

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

در سال ۱۹۶۴ داده‌های مطالعه‌ی بین المللی جذاب و جامعی در زمینه‌ی میزان موفقیت در درس ریاضیات دوره‌ی متوسطه گرد آمد. در سال ۱۹۶۰ هیئتی برای «ارزیابی بین المللی موفقیت تحصیلی» با نام مخفف «آی.ای.ای.» تشکیل شد تا به راه‌های مقایسه‌ی پیشرفت دانش‌آموزان در نظام‌های آموزشی مختلف بنگرد. هیئت بر آن شد که بکوشد عوامل ادراکی و احساسی ذی نفوذ در نظام‌های آموزشی ملی را شناسایی کند و روش‌هایی برای سنجش آن‌ها بیابد. نخست مطالعه‌ی موفقیت آمیزی در مورد عملی بودن یا نبودن صورت گرفت و سپس هیئت تصمیم گرفت کار را با ریاضیات دوره‌ی متوسطه آغاز کند؛ و به این منظور نمونه‌ی بزرگی از گروه‌های دبیرستانی مختلف را از دوازده کشور پیشرفته و کم پیشرفته مورد استفاده قرار داد. در تجزیه و تحلیل داده‌ها، موفقیت در درس ریاضیات با بسیاری متغیرهای شخصی، اجتماعی، اداری و تربیتی که در موردشان از دانش‌آموزان و آموزگاران کسب اطلاع شده بود، ارتباط داده شد. (همان کتاب، ۷۹۵)
در اروپا اصلاح برنامه درسی، پس از آمریکائیان آغاز شد و در آغازهای دهه ۱۹۶۰ سخت تحت تأثیر آنان قرار گرفت. نخستین طرح‌ها نیز در علوم و ریاضیات و پیرو تجربه‌ی آمریکائیان بود. … فرانسه برنامه‌های تجربی را در سال ۱۹۶۴ با ریاضیات جدید آغاز کرد و سپس کمیسیونی برای بهبود آموزش علم و تکنولوژی تشکیل داد. … در آلمان بیشترین کار در زمینه‌ی علوم طبیعی، ریاضیات، … صورت گرفته بود. در انگلستان با کمک «بنیاد نافیلد»، «طرح ریاضیات مدارس» در سال ۱۹۶۱ … آغاز شد. به رغم این حقیقت که «قرن بیستم عصر طلایی ریاضیات بوده است، زیرا بیشترین ریاضیات و عمیق‌ترین ‌ریاضیات در تاریخ بشر در این دوره پدید آمده است.»^[۱۳] هدف «طرح ریاضیات ایلینوی» که به گفته‌ی مدیر آن نخستین طرح در زمینه‌ی «ریاضیات جدید» بود، نو کردن ریاضیات مدارس و دانش‌آموزان بود. «این تلاشی است برای تعیین این که آموزگار باید چه کند تا پاره‌ای از مفاهیم و طرق تفکر را که شالوده‌ی کار ریاضیدانان معاصر است به ذهن نوجوان خطور دهد.»^[۱۴] از این رو برنامه طوری تعیین شد که فهم اصطلاحات ریاضیات جدید و دقت در کاربرد آن‌ها را به شاگرد بیاموزد و او را با اجبار به کشف مستقلانه‌ی قواعد و اصول ریاضی تشویق به تفکر ریاضی کند. (همان کتاب، ۸۱۴-۸۱۳)
۳- ۱۷٫ اریک تمپل بل
اریک تمپل بل در سال ۱۸۸۳ در شهر آبردین اسکاتلند چشم به جهان گشود و تحصیلات را تا دبیرستان در انگلستان طی نمود. در ۱۹۰۲ به آمریکا مهاجرت نمود. و در ۱۹۱۲ دکتری ریاضی را از دانشگاه کلمبیا دریافت نمود و از آن پس دست به یک سلسله اکتشافات عمیق در ریاضیات زد وی در دسامبر ۱۹۶۳ در کالیفرنیا درگذشت.
ریاضیات بزرگترین میراث بشریت می‌باشند و ایجاد و ابداع آن، صرف نظر از فواید عملی و موارد استعمال، از نظر فکری و فرهنگی، همچون ادبیات و موسیقی و غیره از مهمترین افتخارات آدمی است. (تمپل بل، ۱۳۴۸، ۱۲-۱۱)
ریاضیدانان بزرگ هرگز مردمانی آشفته و ژنده پوش نبوده اند؛ طبق آنچه از تاریخچه‌ تفصیلی ایشان بر می‌آید آنان مانند سایر افراد بشر به وضع سر و لباس خود توجه داشته اند؛ بعضی از ایشان زیبا و شیک پوش بودند، بعضی دیگر آشفته و اغلب ایشان لباس عادی می‌پوشیدند بطوری که جلب توجه کسی نمی‌کرد. اگر در دوران ما موجودی که اغتشاش وضع سر و لباس او جلب توجه می‌کند و موهای بلند دارد و کلاه پهن و سیاهی بر سر گذاشته است به طور جدی به شما اظهار دارد که او ریاضیدان می‌باشد، شما می‌توانید با قطعیت شرط بندی کنید که این شخص روانشناسی است که به خواص اسرار آمیز اعداد توجه یافته است. (همان کتاب، ۲۳)
در حالت کلی ریاضیات راه‌های متعددی برای باز شدن فکر در اختیار ما قرار می‌دهد که از مهمترین آن‌ها مطالعه‌ی ریاضیات از جمله شاخه‌ی ترکیبیات است. ریاضیات این کمک را به ما می‌کند تا مشکلات و موضوعات زندگی را بهتر و راحت‌تر تجزیه و تحلیل کنیم. آمارهای جهانی نشان می‌دهد طلاق در خانواده‌هایی که حداقل یکی از همسران ریاضی خوانده است در مقایسه با سایر خانواده‌ها بسیار کمتر است.
بدانید که در بین ایشان حتی یک نفر که دچار فساد جنسی باشد وجود نداشته است. بعضی از ایشان در تمام مدت عمر مجرد باقی مانده‌اند لیکن اغلب این تجرد به واسطه‌ی فقدان وسائل معاش بود؛ اما عموماً ریاضیدانان با عشق و خوشبختی ازدواج کردند و فرزندان خود را با دقت تربیت کردندو در این نکته باید تأکید کرد که در اغلب موارد فرزندان ریاضیدانان استعدادی مافوق استعداد متوسط بوده اند. (همان کتاب ۲۳-۲۲)
بطور کلی می‌توان گفت که ریاضیدانان بزرگ زندگی دلپذیر‌تر و مردانه‌تری از مردم عادی داشته اند، اما غنای زندگی ایشان فقط از جنبه‌ی فرهنگی بروز و ظهور نکرده است، بسیاری از ایشان بیش از آن چه سهم آنان بوده است مواجهه با مخاطرات و اغتشاشات جانی شده اند، بعضی از ایشان مردمی بوده‌اند کینه توز (گمان سوء استفاده از آثارشان و یا پی نبردن به ارزش ایشان)، و یا چیزی که در واقع و بالاخره به همین نتیجه منتهی می‌گردد، با خوب رویت بسیار اهل جدل و مباحثه‌ی لفظی یا قلمی بوده اند. (همان کتاب، ۲۳)
۳- ۱۸٫ادوارد لی ثوراندایک
(۹ آگوست ۱۹۴۹-۳۱ آگوست ۱۸۷۴ )ثوراندایک از سال ۱۸۹۹ تا سال ۱۹۴۰ عضو هیئت آموزشی کالج آموزگاران دانشگاه کلمبیا بود. او برجسته‌ترین ‌روانشناس تربیتی روزگار خود بود. علم برای او «تنها پایه‌ی مطمئن برای پیشرفت اجتماعی» بود.^[۱۵] (کانل، ۱۳۶۸، ۲۰۹)
ثوراندایک نمونه‌هایی از برخورد حاکم را از گفته‌های آموزشگران این دوره نقل کرد، مثلاً از جوف فین نخستین استاد رشته‌ آموزش و پرورش در انگلستان که در «کالج آموزگاران» لندن صاحب کرسی استادی بود: «حساب … اگر درست تدریس شود، انضباط فکری اصیل بی نهایت ارزشمندی ایجاد می‌کند؛ … در شاگرد عادتی پدید می‌آورد مانند تمرکز فکری، توالی استدلالی، دقت مطلق و رضایت از حقیقت منتجه، که به نظر نمی‌رسد به طور مشابه از مطالعه‌ی هر درس دیگری مناسب این مرحله‌ی ابتدایی آموزش حاصل شود»^[۱۶] و از وودر ویلسن رئیس وقت دانشگاه پرینستن و رئیس آینده‌ی جمهوری آمریکا: «ما وقتی از «مطالعات انضباطی» صحبت می‌کنیم… در فکر ریاضیات حساب، جبر و هندسه‌ی ابتدایی، … هستیم… ذهن از کار با آن‌ها پخته می‌شود، روان می‌گردد، نیرو می‌یابد، سازگاری پذیر می‌شود، و به خود اعتماد می‌کند، به شرطی که معلم کار خود و نیروی آن‌ها را بداند.»^[۱۷] (همان کتاب، ۲۳۱-۲۳۰)
۳- ۱۹٫ وینچ
در ارتباط با مقوله‌ی تسری تعلیمات، یک بازرس مدارس در انگلستان به نام وینچ نخستین کسی بود که با مطالعه‌ی انتقال حافظه در کلاس درس به مسأله درآویخت. او در سال ۱۹۱۰ مطالعات زیادی در مورد درس حساب انجام داد و
پی برد که گرچه نسبت مستقیمی میان ورزیدگی در محاسبه و ورزیدگی در حل مسائل وجود دارد، اما ورزیدگی به دست آمده از طریق تمرین محاسبه به ورزیدگی در زمینه‌ی حل مسائل منجر نمی‌شود ولی در مطالعه‌ای که بعداً در مورد استدلال کردن انجام داد پی برد که اگر دستیابی به اصول، مثلاً در زمینه‌ی چگونگی استدلال در ریاضیات، آگاهانه باشد، انتقال قابل ملاحظه‌ای به وضعیت‌های وسیع‌تر صورت می‌گیرد.^[۱۸] (کانل، ۲۳۷،۱۳۶۸)
۳- ۲۰٫ بنجامین بلوم
بلوم (۱۳ سپتامبر ۱۹۹۹- ۲۱ فوریه‌ی ۱۹۱۳) پس از بررسی یک هزار پرونده‌ی مطالعه‌ی دراز مدت در مورد رشد کودکان گزارشی در سال ۱۹۶۴ منتشر کرد. از دید او شواهد نشان می‌دهد که سرعت افزایش هوش در سال‌های نخست زندگی بیش از هر زمان دیگری است؛ و اینکه آثار محیط احتمالاً در پنج سال نخست زندگی از همیشه مهمتر است؛ و اینکه در تکامل زبان کودک، سه چهارم فراگیری در دوره‌ی آمادگی و ابتدایی روی می‌دهد.^[۱۹]
وجه دیگر برنامه‌ها شتاب دادن رشد فکری با تدریس مفاهیم و مهارت‌ها به ویژه در دروس زبان و ریاضیات در سنی زودتر از آن بود که پیش‌تر مناسب به نظر می‌رسید. (کانل، ۱۳۶۸، ۷۸۸)
۳- ۲۱٫ فیثاغورس
فیثاغورس از جمله اندیشمندان پیش سقراطی است که در سال‌های ۴۹۶- ۵۷۱ پیش از میلاد می‌زیست.و از اهالی ساموس یونان بود.
در حقیقت اعداد بیش از هر چیز ذهن فیثاغورس را به خود مشغول کرده بودند. او حتی فکر می‌کرد با بهره گرفتن از ریاضیات می‌توان به توضیح درباره‌ی واقعیت پرداخت. از این گذشته او میان ریاضی و موسیقی رابطه‌ای کشف کرد. (ویت، ۱۲،۱۳۸۷)
۳- ۲۲٫ اقلیدوس اسکندرانی
(حدود۲۷۵-۳۶۵ پیش از میلاد )ریاضیدانی یونانی که در قرن سوم پیش از میلاد در شهر اسکندریه می‌زیست. اقلیدس در پاسخ بطلمیوس سردار که می‌خواست رنج نابرده هندسه بیاموزد، گفت: در هندسه، راهی شاهوار وجود ندارد. (تابش، ۱۳۶۱، مقدمه)
۳- ۲۳٫ دزموند برومز
هدف اساسی هر نظام آموزشی این است که مهارت‌های لازم را به افراد ارائه کند تا بتوانند به عنوان عضوی مفید نقش مؤثری در جامعه ایفا کنند. با توجه به ویژگی‌های جامعه‌ی امروز ریاضیات در ارائه‌ این مهارت‌ها سهم بسزایی دارد چرا که ریاضیات با مشاهده، بخش محاسبه، تحلیل، استنباط، قیاس، اثبات و پیش بینی سر و کار دارد و به عنوان یک نظام ارتباطی به ما کمک می‌کند تا فهم دقیق و درستی از اطلاعات الگوها و استدلال به دست آوریم.
در سال ۱۹۸۹ کمیته‌ی ملی معلمان ریاضی آمریکا هدف کلی برنامه‌ی درسی ریاضی در مقطع ابتدایی را کسب دانش و مهارت و تقویت تفکر منطقی تعیین کرد. (برومز، ۱۳۸۲، ۱۱)
امروزه هدف آموزش ریاضی در دوره‌ی ابتدایی به طور کلی تغییر کرده است. رویکردهای جدید بیشتری روی ساختارها، ارتباطات، اکتشافات، مهارت‌های حل مسأله، تفکر؛ روابط بین فردی و روحیه‌ی همکاری تأکید می‌کند. (همان کتاب، ۱۵)
۳- ۲۴٫ تئونی پاپاس
خانم تئونی پاپاس یونانی است و در دانشگاه‌های برکلی و استنفورد آمریکا تحصیل کرده و اکنون مدرس ریاضیات است. او می‌کوشد ترس از ریاضیات را از ذهن‌ها بزداید و در این راه آثار جذابی را تألیف کرده است.
اندیشه‌های ریاضی تار و پود تخیل هستند. این اندیشه‌ها در دنیای غریب وجود دارند و موضوعات آن از منطق محض و خلاقیت پدید می‌آیند. یک مربع یا دایره‌ی کامل در جهان ریاضیات وجود دارد، در حالی که جهان ما تنها نمایش ریاضی از اشیاء را در خود دارد. (پاپاس، ۱۳۸۸، ۷)
۳- ۲۵٫ مارکوس اورلیوس آگوستینوس
مارکوس اورلیوس آگوستینوس به سال ۳۵۴ میلادی در نُمیدی شمال آفریقا متولد شده است و به سال ۴۳۰ و سن ۷۶ سالگی جان می‌سپارد.
وی اعتقاد داشت تحصیل ریاضی نیز ممکن است مفید افتد. اگوستینوس عقیده دارد که انجیل پر از اشارات عددی است و ریاضی وسیله‌ای است برای صریح فکر کردن. علم معمولاً می‌تواند راهی علیه خرافه باشد. (مایر، ۱۳۷۴، ۲۰۰)
۳- ۲۶٫ یوهان فردریش هربارت
یوهان فردریش هربارت در ۴ می‌سال ۱۷۷۶ میلادی در اولدنبورگ شمال آلمان به دنیا آمد و سرانجام در ۱۱ اوت ۱۸۴۱ میلادی در سن ۶۵ سالگی و در اوج شهرت درگذشت.
او معتقد بود یکی از دو راه توسعه‌ی ذهن راه تمرکز منظم بر واقعیاتی است که باید آن‌ها را اکتشاف کرد و در آن‌ها ورزیده شد؛ از این رو هربارت به خصوص طرفدار ریاضیات است و آن را موجد تفکر قوی می‌شمارد. (مایر، ۱۳۷۴، ۳۸۲)
۳- ۲۷٫ رابرت مینارد هوچینز
(۱۹۷۷-۱۸۹۹) یکی از طرفداران پر آوازه‌ی مکتب پایدارگرایی بود. اعتقاد داشت آموزش و پرورش باید به طور شایسته در خدمت پرورش خرد انسان باشد .
به عقیده‌ی وی ریاضیات دارای ارزش عمومی است، زیرا استدلال را در روشن‌ترین ‌و دقیق‌ترین ‌صورت خود نشان می‌دهد. معارف نظری- … و ریاضیات- ابزارهای قدرتمندی برای آماده‌سازی معلم آینده جهت سازماندهی، بیان و مراوده‌ی معرفت می‌باشد. (ال. گوتک، ۱۳۸۸، ۴۱۶-۴۱۵)
۳- ۲۸٫ جان لاک
جان لاک زاد روز ۲۹ اوت ۱۶۳۲ در بریستول و مرگ وی در تاریخ ۲۸ اکتبر ۱۷۰۴ در اسکس بود. او از مهمترین شارحان نظریه‌ی قرارداد اجتماعی و پیروان مکتب تجربه گرایی است.
وی معتقد بود اگر می‌خواهید کسی به خوبی استدلال کند باید او را بر آن دارید که هم از آغاز، ذهن خود را برای دیدن بستگی اندیشه‌ها و یافتن چگونگی در پی آمدنشان به کار اندازد. برای این مقصود، هیچ درسی بهتر از ریاضی نیست. از این رو من بر آنم که آن را باید به هرکس که وقت و فرصت دارد آموخت. نه برای ریاضیدان شدن؛ بلکه برای خردمند شدن. زیرا با آن که ما بر آنیم که به طبیعت، خردمند زائیده می‌شویم ولی حقیقت این است که طبیعت فقط تخمه‌ی خردمندی را به ما می‌دهد. ما با امکان خردمندی زائیده می‌شویم؛ امکانی که تنها در پرتو کوشش و کارورزی، واقعیت می‌یابد. اشاره‌ی من به ریاضی، فقط برای پدید آوردن عادت استدلال دقیق است نه برای ریاضیدان شدن افراد، آن گاه که از این راه توانائی اندیشیدن برهانی در ما پدید آمد، خواهیم توانست آن را- بر حسب شرایط- درباره‌ی دیگر بخش‌های دانش نیز به کار بریم.^[۲۰] (نقیب زاده، ۱۱۹،۱۳۸۸)
او ریاضیات را به سبب وضوح و نظم منطقی توصیه می‌کرد و می‌گفت درس ریاضی بدین معناست که ما باید بر پیش داوری‌های خود فائق آییم و به طور عینی استدلال کنیم. لاک عقیده دارد پیشرفت علم منوط به پیشرفت ریاضیات است. (مایر، ۱۳۷۴، ۳۲۰)
۳- ۲۹٫ ژآن‌هانری پستالوزی

۳-۲-۲۰- تهیه استوک فلزات
کلرید کادمیوم، کلرید آلومینیوم، نیترات سرب و نیترات نیکل را در آب مقطر یا بافر دیالیز حل کرده، استوک ۱ و ۲ مولاری تهیه کردیم. در یخچال در ۴- درجه سانتیگراد، نگهداری شدند.
۳-۲-۲۱- آماده سازی محیط های کشت باکتری
محیط کشت LB Broth
محیط کشت LB Broth را در حجم یک لیتر با اضافه کردن ۲۰ گرم پودر LB تهیه کردیم، سپس اتوکلاو کرده و پس از خنک شدن با اضافه کردن مقدار مناسبی از آنتی بیوتیک مورد استفاده قرار دادیم.
محیط کشت LB Agar
محیط کشت LB Agar را در حجم ۲۵۰ میلی لیتر با اضافه کردن ۵ گرم LB و ۷۵/۳ گرم آگار تهیه کردیم، سپس اتوکلاو نموده و پس از خنک شدن با اضافه نمودن مقدار مناسبی از آنتی بیوتیک، محیط را داخل پلیت ریخته و از آن جهت محیط کشت جامد باکتری استفاده کردیم.
۳-۳- روش انجام کار
۳-۳-۱- نمایش ساختار پلاسمید نوترکیب pLEICS-01 و توالی ژنی ناحیه تیروزین کینازی پروتئین نوترکیب FGFR2b
A
B
شکل۳۳: توالی ژنی ناحیه کینازی و نقشه شماتیک از پلاسمید .pLEICS-01 تصویر A نشان دهنده توالی ژنی ناحیه تیروزین کینازی پروتئین نوترکیب FGFR2b و تصویر B نشان دهنده نقشه شماتیک از پلاسمید pLEICS-01است. این پلاسمید به پروتئین در ناحیه N-terminal دنباله هیستیدینی اضافه می کند ((His6-tag. وکتور دارای ناحیه برش آنزیمیTEV پروتئاز جهت برداشتن دنباله هیستیدینی از پروتئین است. هم چنین وکتور شامل آغاز کننده T7 و خاتمه دهنده T7 است.
۳-۳-۲- مراحل تولید پروتئین نوترکیب
۳-۳-۲-۱- تهیه ی سلول های پذیرا COMPETENT CELLS))
بدین منظور ابتدا محلول های زیر را آماده کردیم.
۱۰ میلی لیتر محیط کشت استریل LBبدون آنتی بیوتیک تهیه کردیم. همچنین محیط کشت SOB حاوی ۲ گرم تریپتون، ۵/۰ گرم عصاره مخمر، ۰۵/۰ گرم NaCl را در ۹۵ میلی لیتر آب دیونیزه حل کرده و نیز ۱ میلی لیتر KCl میلی مولار اضافه نمودیم و PH محلول را برابر با ۷ تنظیم کردیم و حجم نهایی را با آب دیونیزه به ۱۰۰ رساندیم، در دو فلاسک ۲۵۰ میلی لیتری تقسیم و اتوکلاو نمودیم. قبل از استفاده، به محلول، ۵/۰ میلی لیتر MgCl₂ استریل با غلظت ۲ مولار اضافه کردیم. محلول گلیسرول ۵۰ درصد را پس از آماده کردن جهت استریل سازی اتوکلاو نموده و در دمای ۴ درجه نگهداری کردیم. هم چنین غلظت نهایی گلیسرول در محلول به میزان ۱۵ درصد رسانده شد. محلول CaCl₂ با غلظت ۵۰ میلی مولار را از طریق یک فیلتر ۲/۰ میکرومتری استریل نموده و درون یک محفظه استریل نگهداری کردیم.
روش آماده سازی سلول های پذیرا
روی محیط کشت LB Agar بدون آنتی بیوتیک تهیه شده از قبل سلول های ای کلای BL21 DE3 را استریک کرده و سپس در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد به مدت یک شب انکوبه شد. یک کلونی را از روی پلیت به داخل ۱۰ میلی لیتر محیط کشت استریل وارد کرده و به مدت یک شب در دمای ۳۷ درجه روی انکوباتور شیکردار با ۲۰۰ دور بر دقیقه انکوبه کردیم. یک میلی لیتر از این محیط را به ۵۰ میلی لیتر از محیط کشت SOB اضافه گردید و در دمای ۳۷ درجه روی انکوباتور شیکردار با ۲۰۰ دور بر دقیقه انکوبه شد تا زمانی که جذب در ۶۰۰ نانومتر به ۵/۰ رسید. سپس سلول ها توسط سانتریفیوژ به مدت ۱۰ دقیقه در چهار درجه سانتی گراد با ۵۰۰۰ دور بر دقیقه رسوب داده شد. رسوب سلولی خیلی آرام در ۵۰ میکرو لیتر CaCl₂ سرده شده احیا گردید و به مدت ۳۰ دقیقه روی یخ قرار داده شد. سلول ها مثل قبل رسوب داده شدند و با ۲ میلی لیتر CaCl₂ در حضور سرما به آرامی احیا شدند و سلول ها روی یخ نگهداشته شدند. گلیسرول ۵۰ درصد به سلو ل ها اضافه شد و به آرامی مخلوط گردید. به میزان ۱۰۰ میکرولیتر داخل میکروتیوپ تقسیم شد و در دمای ۷۰- درجه سانتی گراد ذخیره گردید.
۳-۳-۲-۲- ترانسفورماسیون سلول های پذیرا
محلول های مورد نیاز
محلول های مورد نیاز برای ترانسفورماسیون شامل آماده سازی محیط کشت LB broth بدون آنتی بیوتیک و پلیت های LB agar حاوی مقدار مناسبی از آنتی بیوتیک می باشد.

( اینجا فقط تکه ای از متن فایل پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

روش ترانسفورماسیون
داخل اپندورف تیوپ های ۵/۱ میلی لیتری استریل به میزان ۵۰ میکرولیتر از سلول های پذیرا ریخته شد پس از اضافه نمودن ۴ میکرولیتر پلاسمید تخلیص شده (پلاسمیدها به روش مینی پرپ استخراج شده بودند) به آرامی مخلوط گردید و سپس به مدت ۳۰ دقیقه روی یخ انکوبه شد. از دمای ۴۲ درجه سانتی گراد به مدت ۴۵ ثانیه به منظور ایجاد شوک حرارتی استفاده گردید. نمونه ها به مدت ۵ دقیقه روی یخ قرار داده شدند. به میزان ۳۰۰ میکرولیتر LB broth بدون آنتی بیوتیک به مخلوط اضافه نموده و به مدت ۴۵ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد و داخل انکوباتور شیکردار انکوباسیون را انجام دادیم. سلول هارا داخل پلیت های LB agar حاوی مقدار مناسبی از آنتی بیوتیک به صورت زیر تقسیم شدند. پلیت A شامل سلول های پذیرای حاوی پلاسمید و آنتی بیوتیک مناسب. پلیت B شامل سلول های پذیرا و آنتی بیوتیک. پلیت Cشامل سلول های پذیرا و آگار فاقد آنتی بیوتیک. سرانجام در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد به مدت یک شب انکوباسیون صورت گرفت. اگر کار درست انجام شده باشد باید روی پلیت های A و C کلنی باکتری رشد کرده باشد ولی روی پلیت B کلنی باکتری مشاهده نگردد. کلنی های باکتریایی که روی پلیت A رشد می کنند حاوی کلنی های حاوی پلاسمید مورد نظر هستند (شکل ۳۴).

شکل ۳۴: شمای کلی از روش ترانسفورماسیون.
۳-۳-۲-۳- بررسی بیان پروتئین در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد
از کلنی های ترانسفورم شده، یک کلنی مناسب انتخاب می شود و داخل ۳ میلی لیتر از محیط کشت LB که حاوی ۱۰۰ میکروگرم بر میلی لیتر آمپی سیلین بود انکوبه گردید و تقریبأ به مدت ۳ ساعت در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد و داخل انکوباتور شیکردار با دور rpm 200 رشد داده شد. سپس به منظور ساب کالچر به میزان ۵/۰ میلی لیتر از کالچرهای رشد داده شده به داخل ۵۰ میلی لیتر از محیط کشت تازه LB که حاوی ۱۰۰ میکروگرم بر میلی لیتر آمپی سیلین بود منتقل گردید و به مدت یک شب در همان شرایط داخل انکوباتور شیکردار قرار گرفت. بعد از این مرحله سلول ها به مدت ۱۰ دقیقه درون سانتریفیوژ با دور rpm5000 گذاشته شدند. سپس رسوب های سلولی حاصل با ۱ میلی لیتر از LB تازه بدون آنتی بیوتیک احیا گردیدند و پس از آن به ۵۰ میلی لیتر از محیط کشت تازه LB که حاوی ۱۰۰ میکروگرم بر میلی لیتر آمپی سیلین بود جهت ساب کالچر انتقال داده شدند. این مرحله تا زمانی که جذب در ۶۰۰ نانومتر به حدود ۱/۰ برسد ادامه یافت. از باقیمانده ی رسوب سلولی نیز جهت استخراج پلاسمید در فریزر نگهداری شد. درادامه به منظور رشد بیشتر کالچرها در دمای ۳۷ درجه داخل انکوباتور شیکردار قرار داده شدند تا زمانی که جذب در ۶۰۰ نانومتر برابر ۶/۰تا ۷/۰ شد. به این مرحله فاز رشد لگاریتمی میگویند. سپس از هر کالچر به میزان ۵۰۰ میکرولیتر داخل میکروتیوپ استریل ریخته شد و در دمای ۲۰- درجه سانتی گراد به منظور نمونه قبل از القا جهت آنالیز SDS-PAGE ذخیره شد. هم چنین به میزان ۷۰۰ میکرولیتر از کالچر قبل از القا با ۳۰۰ میکرولیتر ازگلیسرول ۵۰ درصد مخلوط گردید واستوک حاصل با ۱۵ درصد گلیسرول در دمای ۸۰- درجه سانتیگراد نگهداری گردید. سپس القای بیان پروتئین ها با اضافه نمودن IPTG به میزان ۱ میلی مولار صورت گرفت. پس از هر ساعت که از زمان القای بیان پروتئین گذشت به منظورجمع آوری نمونه بعد از القا جهت آنالیز SDS-PAGE براساس حجم نمونه ی جمع آوری شده در مرحله قبل از القای بیان پروتئین، نرمالایز صورت گرفت. نمونه ها به مدت ۵ دقیقه در سانتریفوژ با دور rpm 5000 قرارگرفتند و سرانجام رسوب سلولی حاصل جهت آنالیز SDS-PAGE برای بررسی پروتئین تولید شده مورد استفاده قرار گرفتند.
۳-۳-۲-۴- ارزیابی حلالیت پروتئین بیان شده در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد
جهت ارزیابی حلالیت پروتئین بیان شده پس از القا، در نهایت به مدت ۱۰ دقیقه کالچرها در سانتریفیوژ با دور rpm 5000 قرار داده شد و رسوب سلولی حاصل با اضافه نمودن ۱۰ میلی لیتر بافر لیز سلولی احیا گردید و سپس سلول ها به مدت ۲ دقیقه با بهره گرفتن از سونیکاتور که روی شرایط ۲۰ ثانیه روشن و ۲۰ ثانیه خاموش و بالاترین ولتاژ تنظیم شده بود سونیکیت گردیده و لیز شدند. به منظور آنالیز SDS-PAGE از لایزت سلولی حاصل به میزان ۱۰۰ میکرولیتر به عنوان لایزت کل سلولی جمع آوری شد و همچنین به مدت ۲۰ دقیقه باقیمانده ی لایزت را در سانتریفیوژ با دور rpm12500 قرارداده شد. به منظور آنالیز SDS-PAGE از لایزت شفاف (soluble fractions) به میزان ۲۰ میکرولیتر جمع آوری و نگهداری شد.
۳-۳-۲-۵- روش انجام SDS-PAGE به منظور بررسی بیان پروتئین
هر نمونه با ۴۰ میکرولیتر آب دیونیزه و۶۰ میکرولیتراز بافرنمونه مخلوط شدند.سپس به مدت ۱۰ دقیقه در دمای ۹۵ درجه سانتیگراد حرارت داده شدند و همچنین به مدت ۱۵ دقیقه با حداکثر دور سانتریفیوژ شدند. پس از سانتریفیوژ به میزان ۲۰ میکرولیتر از سوپرناتانت هر نمونه درون چاهک های ژل با گرادیان غلظتی ۴ تا ۱۲ درصد از پلی آکریل آمید ریخته شد و هم چنین مارکر وزن مولکولی نیز درون یک چاهک قرار گرفت. جهت الکتروفرز ولتاژی برابر با ولت ۲۰۰ به مدت ۳۵ دقیقه درون میزان مناسبی از بافر الکترود برقرار شد. پس از اتمام الکتروفورز، ژل با بافر رنگ آمیزی به مدت ۳۵ دقیقه رنگ می شود و درآخر با بافر رنگ بر به مدت ۳۰ دقیقه رنگ زدایی صورت می گیرد.
شکل ۳۵: روش انجام SDS-PAGE به منظور بررسی بیان پروتئین.
۳-۳-۲-۶- ارزیابی حلالیت پروتئین بیان شده در دمای ۲۰ درجه سانتی گراد
در آنالیز SDS-PAGE جهت ارزیابی حلالیت پروتئین بیان شده در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد نمونه ی لایزت کل سلولی با سوپرناتانت لایزت شفاف مقایسه گردید. از آنجا که در این دما پروتئین محلول نبود با تغییر شرایط آزمایش به صورت کاهش دمای رشد باکتری از ۳۷ درجه به ۲۰ درجه سانتیگراد القای تولید پروتئین صورت گرفت. در این روش پس از کشت اولیه و رسیدن به زمانیکه جذب در ۶۰۰ نانومتر برابر با ۶/۰تا ۷/۰ بود کالچرها به مدت ۱ ساعت در دمای ۲۰ درجه سانتیگراد درون شیکر انکوباتور یخچال دار قرار داده شدند، هم چنین به منظور آنالیز SDS-PAGE به میزان ۱۰۰ میکرولیتر نمونه تحت عنوان قبل از القا جمع آوری گردید. سپس به میزان ۱ میلی مولار IPTG جهت القا به محیط کشت افزوده شد و به مدت یک شب در دمای ۲۰ درجه سانتیگراد در انکوباتور یخچال دار قرار داده شد. پس از تایید محلول شدن در دمای ۲۰ درجه سانتیگراد، پروتئین به میزان ۱ لیتر تولید گردید و در نهایت رسوب سلولی حاصل جهت تخلیص پروتئین جمع آوری گردید.
۳-۳-۲-۷- تخلیص پروتئین با بهره گرفتن از ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی
رسوب سلولی حاصل در ۳۰ میلی لیتر بافر لیز کننده احیا گردید و سونیکیت شد. سپس به مدت ۱ ساعت داخل سانتریفیوژ با دور rpm 13500 در دمای ۴ درجه سانتیگراد قرار گرفت. پس از سانتریفیوژ، سوپرناتانت شفاف جمع آوری شد و جهت خالص سازی پروتئین در ستون حاوی ۵ میلی لیتر از NTA – ^۲+ Ni ریخته شد. سپس ستون با یک گرادیان غلظتی افزایشی از ایمیدازول ۵۰، ۷۵، ۱۰۰، ۱۵۰ و ۲۰۰ میلی مولار شسته شد. پروتئین سرانجام در غلظت ۷۵ میلی مولار از ستون خارج گردید. میزان خلوص پروتئین مد نظر توسط آنالیز SDS-PAGE ارزیابی گردید. فرکشن های حاوی پروتئین هدف با هم ترکیب شده و به مدت ۶ ساعت در ۴ لیتر از بافر دیالیز قرار گرفت. نمونه دیالیز شده با آنالیز SDS-PAGE بررسی گردید.

شکل ۳۶: تخلیص پروتئین با بهره گرفتن از ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی.
۳-۳-۳- تعیین غلظت پروتئین
با بهره گرفتن از دستگاه نانو درآپ غلظت پروتئین اندازه گیری شد. قبل از اندازه گیری، سیستم با بهره گرفتن از یک محلول بلانک (۲ میکرولیتر از بافر حاوی ۲۵ میلی مولار Tris-Hcl و ۱۰۰ میلی مولار NaCl با PH برابر ۵/۷) صفرشد. در این محاسبه وزن مولکولی پروتئین به میزان ۳۸ کیلو دالتون اعمال شد.
۳-۳-۴- مطالعات اسپکتروسکوپی فلوئورسانس
برای بررسی ساختار سوم پروتئین تخلیص شده در شرایط متفاوت از روش فلوئورسانس ذاتی استفاده شد. انداره گیری شدت فلوئورسانس ذاتی با دستگاه اسپکتروفلوریمتر واریان کری اکلیپس مدل Bio 700، حاوی کووت کوارتز با طول مسیر ۱۰ میلی متر صورت گرفت. آشکارساز (PMT)روی ولتاژ متوسط تنظیم شد. هر یک از دو شکاف های تحریکی و انتشاری با یک باند پاس ۵ نانومتر استفاده شد. طول موج تحریک پروتئین ۲۸۰ نانومتر بود و داده ها در دمای اتاق و طول موج نشری ۳۰۰ تا ۴۵۰ نانومتر جمع آوری شدند. به منظور از بین بردن اثر پس زمینه ی بافر حاوی پروتئین روی شدت فلوئورسانس، سیستم با بهره گرفتن از یک محلول بلانک (۴۰۰ میکرولیتر از بافر) صفر شد.
پروتئین با غلظت ۳ میلی گرم بر میلی لیتر در بافر حاوی ۲۵ میلی مولار Tris-Hcl و ۱۰۰ میلی مولار NaCl با PH برابر ۵/۷ تهیه شد. غلظت پروتئین در همه ی محلول های مورد آزمایش ثابت نگه داشته شد. به میزان ۱۵ میکرولیتر از نمونه پروتئینی داخل کووت ۴۰۰ میکرولیتری ریخته و با بافر به حجم نهایی رساندیم. به منظور بررسی اثر فلزات سمی روی شدت فلوئورسانس پروتئین، چندین محلول حاوی غلظت های ثابت از پروتئین در حضور غلظت های متفاوت از محدوده ی ۱۰۰ میکرومولار تا ۱۰۰۰میکرومولار از کلرید کادمیوم، کلرید آلومینیوم، نیترات سرب و نیترات نیکل و اثر هرکدام در شرایط نرمال بررسی گردید. هم چنین با اضافه کردن میزان مناسبی از بافر به هر نمونه، حجم نهایی محلول به میزان ۴۰۰ میکرولیتر نگه داشته شد. سپس طیف نشری بعد از گذشت زمان اینکوبیشن به مدت ۳۰ دقیقه گرفته شد. آزمایشات اولیه در جهت تعیین حداقل و حداکثر غلظتی از فلزات سمی که روی طیف نشری فلوئورسانس اثر میگذاشت صورت گرفت. طیف نشری حاصل از پروتئین در حضور و عدم حضور فلزات سمی با هم مقایسه شد. هر آزمایش دو بار برای هر طیف نشری تکرار شد.
شکل ۳۷: اسپکتروفلوریمتری Cary مدل Bio700 (Spectrofluorimetry).
۳-۳-۵- مطالعات اسپکتروسکوپی دورنگ نمایی حلقوی CD))
مطالعه دورنگ نمایی حلقوی در ناحیه فرابنفش دور (Far-UV-CD) در محدوده طول موج ۱۹۰ تا ۲۶۰ نانومتر، با اسپکتروپلاریمتر انجام شد. برای بدست آوردن مقادیر ساختار دوم منظم پروتئین، این طیف سنجی در غلظت ۱۵ میکرومولار پروتئین در بافر حاوی ۲۵ میلی مولار Tris-Hcl و ۱۰۰ میلی مولار NaCl با PH برابر ۵/۷ انجام گرفت. ابتدا دستگاه توسط بافر بلانک شد. سپس به میزان ۵۰ میکرولیتر از نمونه پروتئینی داخل کووت ۳۰۰ میکرولیتری ریخته و با بافر به حجم ۳۰۰ رساندیم. طیف های بدست آمده با دو بار تکرار و تصحیح در برابر بافر به عنوان شاهد، با نرم افزار مخصوص کاهش نویز از طریق تبدیل فوریه کاملا صاف شدند. آزمایش ها در حضور حداکثر غلظت موثر مشاهده شده در طیف نشری فلوئورسانس یعنی ۵/۰ مولار برای کلراید آلومینیوم، ۱۰ میلی مولار برای نیترات نیکل، ۶ میلی مولار برای کلراید کادمیوم و ۳۰۰ میکرومولار برای نیترات سرب، صورت گرفت. داده های مربوط به کمک نرم افزار آنالیز طیف های بیضی وارCD spectra deconvolution)) برای محاسبه ی درصد ساختارها مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند.